Определение группы крови и резус-фактора

Оказание помощи врачу при наложении лейкопластырного скелетного вытяжения и вытяжения с помощью петли Глиссона

Уложить пациента на горизонтальную поверхность кровати с системой блоков и грузом в изголовье

Закрепить петлю Глиссона на голове либо из лейкопластыря сформировать петлю в основании черепа так, чтобы она фиксировалась у основания черепа (под подбородком и под большими затылочными буграми)

Прикрепить груз весом 6 кг (вес груза зависит от вида повреждения и определяется врачом)

Накладывать утром для предупреждения кровенаполнения и растяжения вен

Придать ноге возвышенное положение под углом 45 град.

Первые туры сделать у основания пальцев

Далее по спирали бинтовать до паховой складки

Туры должны оказывать умеренное давление на мягкие ткани; не должны вызывать неприятные ощущения; пальцы на стопе должны быть розовыми

36. Применение съемного бандажа, корсета

Предназначением бандажа, корсета является фиксация части туловища в функциональном состоянии, предупреждение осложнений, связанных с анатомическими дефектами тела, приводящими в отсутствии бандажа или корсета к более грубым анатомическим и функциональным расстройствам

Бандаж (корсет) должен содержаться в чистоте

Пациент должен принять горизонтальное положение перед надеванием бандажа (корсета)

При надевании не защемлять кожу; не допускать болезненных ощущений

Пуговицы и петли должны располагаться на лицевой стороне бандажа; лямки не должны «впиваться» в мягкие ткани.

Пребывание в бандаже (корсете) не должно приводить к нарушениям дыхания и сердечной деятельности

Примечания

Порядок взятия крови для иммуногематологического исследования должен соответствовать следующим положениям:

  • взятие венозной крови проводится ответственным медицинским работником;
  • если реципиент получает внутривенные вливания, образец крови для исследования берется из вены с противоположной стороны;
  • в некоторых случаях для иммуногематологического исследования допускается использование капиллярной крови, взятие крови производится лаборантом непосредственно перед исследованием;
  • Тесты проводят при температуре окружающей среды +15оС +25оС;
  • Хранение крови до тестирования допускается при температуре +2оС +8оС до 48 часов;
  • Не допускается на исследование образец крови с признаками видимого гемолиза;
  • Хранить реагенты при температуре +2оС +8оС, использовать до даты указанной на упаковке (кроме случаев, указания особых требований завода – изготовителя);
  • Направление на анализ должно содержать следующие сведения:
  • фамилия, имя, отчество реципиента, дата рождения, пол;
  • номер медицинской карты стационарного больного;
  • наименование отделения;
  • наименование теста;
  • клинические детали;
  • отметка о срочности выполнения исследования (если требуется);
  • фамилия, имя, отчество лица, выполнившего первичное исследование группы крови или направляющего кровь на другие виды исследование;
  • Маркировка пробирки с образцом должна содержать полное имя (фамилия, имя, отчество), дату рождения, местонахождение (отделение), дату взятия образца крови;
  • Подтверждение групповой и резус принадлежности крови пациента проводится в течение суток;
  • Бланк с результатом исследования вклеивается в медицинскую карту с обратной стороны титульного листа;
  • Не допускается переносить данные о групповой и резус принадлежности крови на титульный лист медицинской карты из других документов и источников, а также принимать подтверждение групповой и резус принадлежности, выполненное до госпитализации.
  • Сроки хранения образца крови:
  • образца крови реципиента для проведения иммуногематологических исследований при соблюдении условий хранения – не более 2 суток;
  • образца крови реципиента после проведения иммуногематологических исследований – не менее 2 суток;
  • хранение образцов крови реципиента и донора после постановки проб на индивидуальную совместимость – не менее 5 суток.
  • Образцы крови, имеющие признаки гемолиза или хилеза, не подлежат исследованию;
  • Запрещается встряхивать пробирки – резкое смешивание может вызвать пенообразование и гемолиз. Необходимо избегать попадания прямого солнечного света на пробу, т.к. это может повлиять на результаты проводимых анализов.

Материал проверен экспертами Актион Медицина

Техника определения в пробирке

  1. Подготовьте 5 % взвесь отмытых эритроцитов в физрастворе.
  2. Добавьте в пробирку 0,1 мл цоликлона Анти-D-Супер (Анти-D IgM) и одну каплю эритроцитов.
  3. Перемешайте содержимое.
  4. Инкубируйте пробирку на протяжении получаса. Скорость реакции увеличивается при подогреве пробирки до 37 °С с использованием водяной бани или термостата.
  5. Центрифугируйте пробирку со скоростью 1500 — 2000 оборотов в минуту при комнатной температуре на протяжении полминуты.
  6. Слегка встряхните пробирку для отделения осадка от дна.
  7. Визуально оцените наличие агглютинации. При обнаружении антигена D образуются один или несколько явно различимых агглютинатов на фоне прозрачного раствора NaCl. В противном случае осадок легко разбивается и является непрозрачной гомогенной взвесью.

инкубация в термостате
центрифугирование
выраженные агглютинаты
непрозрачная суспензия

Препараты цоликлонов

Выделяют эритротест-цоликлон анти-D.

Существуют три разновидности:

  • Обычный анти-D-цоликлон. При его добавлении развивается реакция непрямой агглютинации,
  • Супер. Вызывает прямую агглютинацию,
  • Препарат анти-D-микс, имеющий в составе компоненты обычного и супер цоликлона анти-D). С их помощью можно как выявить группу крови, так и определить резус-принадлежность крови.

Отличие других растворов состоит в названии, поскольку входящие в их состав антитела – иммуноглобулины М и G – предоставляют возможность только произвести типизацию крови по антигенам АВ0. Различие заключается исключительно в механизме слипания эритроцитов (агглютинация прямая/непрямая).

Определение групп крови с помощью цоликлонов

Цоликлонами являются моноклинальные антитела, которые получают из крови лабораторных мышей. Делается всё посредством генной инженерии. Группу крови, в наше время, системы АВО, устанавливают именно с помощью данных антител.
Чрезвычайно большую и высокую активность и авидность демонстрируют цоликлоны, что предполагает время прихода и степень выраженности реакции агглютинации (склеивания).
Такая техника применяется только в условиях полноценной лаборатории. Причем внутри кабинета температура обязана быть в пределах начиная с +15.0 и вплоть до + 25.0 градусов по Цельсию. А сам процесс установления группы крови может происходить лишь при отличном освещении.

Несколько советов
— Чтобы исключить снижение активности антител по причине высыхания, реагенты следует хранить только плотно закрытыми.
— Не рекомендуется пользоваться реагентами, которые содержат хлопья и являются мутными.
— Для выполнения данной работы будет необходима специальная отдельная пипетка, по отдельности для каждого анализа.
— Процесс определения следует проводить на специальном планшете либо тарелке, обычно используется белый цвет, при хорошо смоченной поверхности. Поскольку цоликлоны характеризуются достаточно высокой авидностью и активностью, в таких условиях возможно использование по 1 серии реагентов анти-A, а также анти-B.

Алгоритм действий
1. На планшете следует поставить обозначения : анти-A и анти-B.
2. Далее капают цоликлоны величиной приблизительно по 0,10 мл под соответствующие подписи. Следует отметить, что реагент анти-A обладает желтовато-розовым цветом, анти-B – синим. Это следует запомнить.
3. Затем, вблизи моноклональных антител, необходимо капнуть по небольшой капле крови и хорошо смешать ее с реагентами.
Делать это надлежит при помощи специальной стеклянной палочки либо уголком стекла. Причем если предстоит смешать последующую пару капель, то перед данным действием палочка или стекло хорошо промывается и вытирается.
4. В течение последующих 2,5 минут за агглютинацией ведется наблюдение. В процессе этого планшет следует немного покачивать. Далее остается только оценить результат.

Анализ результата
1. Если нет агглютинации с двумя цоликлонами, то у вас 1-ая крови;
2. При существовании агглютинации с цоликлоном анти-А перед вами 2-ая группа;
3. Агглютинация с цоликлоном анти-В указывает на 3-ую группу крови;
4. Наличие агглютинации с парой цоликлонов – это 4 группа, при этом она обязана подтверждаться агглютинацией с цоликлоном анти-АВ при отсутствии неспецифической агглютинации относительно изотонического раствора натрия хлорида.

Для наглядности, предлагаем вам посмотреть это видео:

https://youtube.com/watch?v=GjfHVjSgwdQ

Важные моменты

Метод определения группы крови с помощью цоликлонов является достаточно точным. Неверные результаты анализа чаще всего бывают вызваны ошибками, допущенными при его проведении. Для того, чтобы избежать их, необходимо учитывать несколько важных моментов.

  1. Цоликлоны обязательно должны храниться в холодильнике при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия. Более того, вскрытый флакон можно хранить там только в течение месяца, плотно закрытым. При несоблюдении этого правила реагенты могут поменять свои свойства, поэтому нельзя использовать просроченные или неправильно хранившиеся цоликлоны.
  2. Анализ должен проводиться при хорошем освещении и температуре воздуха в помещении от 15 до 25 градусов. Если жаркая погода не позволяет соблюсти нужный температурный режим, то исследование необходимо провести на охлажденном планшете.
  3. Необходимо четко знать, в какой капле находится цоликлон Анти-A, а в какой — Анти-B, именно для этого планшет обязательно следует подписать маркером или карандашом по стеклу. Несмотря на то, что жидкости различаются по цвету, после смешивания с кровью это отличие становится не так очевидно, и есть риск запутаться.
  4. Капля крови не должна быть слишком большой или маленькой, идеальное соотношение крови и цоликлона 2:10 — 3:10. При слишком большом количестве эритроцитов реакция агглютинации может быть недостаточно заметной, а при недостатке она будет происходить очень медленно.
  5. Жидкости из двух исследуемых капель ни в коем случае не должны соприкасаться между собой. Если это все же произошло, нужно провести исследование заново.
  6. Если вы используете стеклянные палочки для смешивания крови и цоликлона, то они должны быть индивидуальными для каждой капли.
  7. Продолжительность наблюдения за реакцией агглютинации должна быть не менее 3 минут, а при возникающих сомнениях — все 5. Несмотря на то, что склеивание эритроцитов происходит уже в течение первых 10 секунд, не стоит делать поспешные выводы, увидев агглютинацию в одной из капель.

Продолжив наблюдение, вы можете, к своему удивлению, заметить замедленную реакцию и со вторым цоликлоном, если у исследуемой крови есть свои особенности. Однако по прошествии слишком большого времени может произойти подсыхание крови и естественное оседание эритроцитов, поэтому таким результатам доверять не стоит.

Планшет необходимо покачивать в течение всего периода наблюдения, в противном случае эритроциты могут оседать по краям капли, что ошибочно принимается за их агглютинацию.

Напротив, при лейкозах происходит снижение агглютиногенных свойств эритроцитов, и они могут не вступать в реакцию даже при применении реагентов высокой активности, такое наблюдается также у новорожденных детей. У некоторых групп лиц, таких как близнецы и пациенты, перенесшие пересадку костного мозга или многочисленные переливания некорректно подобранной крови, возникает редкое явление, называемое кровяной химерой.

Это означает, что в их организме сосуществуют эритроциты, относящиеся к разным группам крови. Исследование крови таких людей представляет немалую сложность. Поэтому в случае неясного результата анализа кровь лучше подвергнуть более точному исследованию в условиях лаборатории.

https://youtube.com/watch?v=GjfHVjSgwdQ

Определение группы крови — важнейшее исследование, где от точности полученного результата зависит жизнь пациента. При переливании неправильно подобранной крови развиваются тяжелые осложнения от лихорадки до повреждения легких и летального исхода, ведь реакция агглютинации, наблюдаемая нами на планшете, произойдет непосредственно в организме реципиента.

Поэтому результаты экспресс-исследования с помощью цоликлонов, которое может быть произведено непосредственно при заборе крови в процедурном кабинете, требуют подтверждения лабораторными методами в специализированной лаборатории.

Сегодня определение группы крови цоликлонами становится все более частым благодаря простоте и точности методики при правильном соблюдении алгоритма исследования. Если раньше такой анализ был доступен лишь в профильном стационаре, то теперь многие лаборатории отказываются от других, более сложных методов, в пользу цоликлонов.

При желании узнать свою группу крови вы можете сделать это в поликлинике по месту жительства с соответствующим направлением от терапевта либо в частном медицинском центре. Владея минимальными медицинскими навыками и имея в своем распоряжении цоликлоны, вы можете провести такое исследование и в домашних условиях, но в этом случае нужно особо строго отнестись к соблюдению правил асептики и антисептики.

Определение группы крови с помощью цоликлонов алгоритм и интерпретация результатов

Определение группы эритроцитарных антигенов и резус-фактора давно стало одним из обязательных исследований для большинства пациентов, поступающих на стационарное лечение. Его проведение возможно на любом уровне оказания медицинской помощи при условии наличия необходимых реагентов и инструментов.

Обычно, определение группы проводится с помощью стандартных сывороток, хотя, конкуренцию ему составляет еще один метод, сходный по методике проведения с эталонным – использование цоликлонов.

Цоликлон – моноклональное антитело, образующееся путем генной инженерии. Чаще всего, для его получения используют мышей – животному вводят специальный антиген, а после получают асцитную жидкость грызуна, в которой и содержатся указанные антитела.

Морфологически, они относятся к иммуноглобулинам класса М, т.е. антителам острой фазы. Механизм действия их обусловлен образованием комплекса антиген-антитело, где в качестве антигена выступают некоторые молекулы (в данной ситуации – белки, определяющие группу крови и ее резус), расположенные на мембране клетки.

Ресурсы

  • Кровь (эритроциты) реципиента;
  • Цоликлоны анти-А, анти-В, анти-АВ, Д-супер;
  • 0,9% раствор натрия хлорида;
  • Планшеты;
  • Пипетки, пробирки (вакутайнеры) ёмкостью не менее 10 мл (для центрифугирования или биологическая);
  • Центрифуга;
  • Песочные часы;
  • Штатив для пробирок;
  • Комнатный термометр;
  • Шприцы;
  • Гелиевые карточки;
  • Стерильные ватные шарики;
  • Раствор этилового спирта Спирт 700;
  • Средства индивидуальной защиты: колпак, маска, очки, стерильные перчатки;
  • Дезинфицирующий раствор;
  • Антисептическое мыло и кожный антисептик для обработки рук;
  • КБСУ для медицинских отходов класса «Б».

Нюансы процедуры

Точность исследования ГК и резус-фактора с помощью цоликлонов очень высока, однако порой анализ выдает неправильные результаты: причиной является фактор человеческой ошибки, когда процедуру проводят с нарушениями.

Чтобы снизить риск такой ошибки, нужно помнить о следующих аспектах:

Цоликлоны хранятся в холодильнике, оптимальный температурный режим – +2… +8 градусов по Цельсию. Если флакон распечатан, его содержимое нужно использовать в течение 30 дней, крышка должна быть плотно завинчена. Реагенты очень чувствительны к внешним воздействиям и при несоблюдении правил хранения или по истечении срока теряют свои качества, что приводит к ошибкам.
Исследование проводится при ярком освещении, оптимальный режим в лаборатории – +15… +25 градусов по Цельсию

Если климатические условия не дают возможности соблюсти нужную температуру воздуха, поверхность планшета перед процедурой охлаждают.
Важно не спутать, какие цоликлоны где находятся на планшете, для этой цели их местоположение обозначается на поверхности маркером. Хотя реагенты анти-А и анти-B имеют цветовое различие, после добавления крови оно практически исчезает.
Следует соблюдать пропорции жидкостей: если эритроцитов будет слишком много, реакцию агглютинации будет сложнее отследить, в противоположном случае (слишком малый объем) склеивание происходит в замедлении.
Нельзя допустить, чтобы две капли соединились: даже касание краями приводит к искажению результатов анализа

Если жидкости все же слились, исследование с помощью цоликлонов проводят сначала.
При смешении при помощи лабораторной стеклянной палочки необходимо брать отдельный предмет для каждой изучаемой капли.
Минимальная продолжительность наблюдения – 3 минуты, при неоднозначных результатах исследование длится до 5 минут.

В ходе процедуры можно отметить и реакции, способные ввести в заблуждение: например, замедленное склеивание происходит при воздействии второго реагента. Когда реакция затягивается, со временем жидкость подсыхает, что сопровождается естественным выпадением эритроцитов в осадок, поэтому этот результат не считается достоверным.

Также в ряде случаев отмечается оседание кровяных телец по краям: неопытные специалисты принимают эффект за склеивание, но в действительности это случается, если планшет оставили в неподвижном состоянии, наблюдая за реакцией. Только если поверхность слегка раскачивали, результат можно считать правильным.

Также определить группу может быть сложно, если пациент страдает от одной из болезней, изменяющих свойства кровяных телец. К таким заболеваниям относят проблемы печени, селезенки, пневмонию, ожоги различной степени, сепсис. Наличие таких болезней сильно обостряет способность эритроцитов выпадать в осадок, и панагглютинация наблюдается даже при воздействии физраствора.

Справочно. Панагглютинация представляет собой искажение процесса склеивания (агглютинации). Изменение белкового состава сыворотки крови может привести к склеиванию всех со всеми.

С другой стороны, цоликлоны не вызовут агглютинацию, если пациент страдает лейкозом: при этой болезни кровяные тельца не реагируют даже на высокоактивные раздражители, такое же явление характерно для младенцев.

Важно. У близнецов и людей, перенесших операцию по пересадке костного мозга или частые переливания жидкости иной группы, может появиться кровяная химера, при которой в кровеносной системе уживаются эритроциты различных типов.. В этом случае анализ особенно труден, для максимально точного определения химического состава требуется провести дополнительные лабораторные исследования с использованием специального оборудования и других способов

В этом случае анализ особенно труден, для максимально точного определения химического состава требуется провести дополнительные лабораторные исследования с использованием специального оборудования и других способов.

Определение группы крови цоликлонами

Чтобы узнать ГК, используя цоликлоны, необходимо взять изделие с плоской поверхностью (планшет), сами реагенты и две капли крови. Для анализа подходит практически любая жидкость независимо от состояния (законсервированная или без консерванта) и способа забора (из вены/пальца). Перед нанесением на поверхности планшета делаются пометки, показывающие, где будет использоваться тот или иной цоликлон.

После подготовки поверхности лаборант наносит на нее по крупной капле реагента: обычно анти-А располагают слева, а анти-B – справа. Затем к веществу добавляют по кровяной капле, ее размер должен быть десятикратно меньше объема нанесенной жидкости.

Планшет требуется осторожно раскачивать из стороны в сторону, чтобы цоликлоны и кровь перемешались, но капли с разными реагентами не слились друг с другом. Спустя несколько минут можно наблюдать полное соединение жидкостей либо реакцию агглютинации, когда эритроциты склеиваются, а и наступает свертывание

Результаты исследования расшифровывают следующим образом:

  • Отсутствие агглютинации в обоих случаях определяет первую группу.
  • Сворачивание при воздействии цоликлона анти-А говорит о том, что кровь относится ко второй группе.
  • Агглютинация в капле с реагентом анти-B – признак третьей группы.
  • Выпадение осадка в обоих каплях говорит о принадлежности к четвертой группе.

В случае появления последней реакции данные требуется проверить с помощью повторных анализов: кровяная капля смешивается с цоликлоном анти-AB, появление агглютинации подтвердит результат первого исследования. Вторая проверка исключает склеивание эритроцитов неспецифичного типа, которое может произойти при наличии ряда тяжелых болезней.

В рамках второго исследования кровь добавляют в раствор хлорида натрия: если жидкость относится к четвертой группе, положительной реакции на физраствор быть не должно, иначе речь идет о наличии заболевания, меняющего свойства кровяных телец.

Методы определения

Сущность всех методов определения резус-фактора заключается в прохождении реакции склеивания (агглютинации) эритроцитов.

Различают четыре метода определения резус-фактора:

Метод конглютинации

Для проведения анализа конглютинативным методом используют сосуды Петри, пипетки одноразовые, физраствор, стандартные serum ко всем группам крови.

Проведение анализа заключается в следующих действиях лаборанта:

  • Наносят на поверхность чашки Петри три ряда(серии) капель реагента, по две в каждом;
  • В каждую серию добавляют каплю испытуемой крови и по капельке контрольных позитивных и контрольных негативных эритроцитов;
  • Смешивают и выдерживают на водяной бане при 47°C десять минут;
  • Определяют результат. Позитивным считают выпадение хлопьев, а негативным их отсутствие.

Метод цоликлонов

Фактор резус обнаруживают при помощи моноклональных антител. Это иммуноглобулины в крови, которые продуцируются клетками, произошедшими от одной предшественницы, то есть моноклоном. Реагенты, выделенные из таких клеток, получили название цоликлоны.

Ампулы с цоликлонами

Определение резус-фактора крови цоликлонами проводят в натуральной крови. Используют метод прямого скучивания на планшете. В лунку пластины вносят одну крупную каплю цоликлона, рядом помещают каплю крови небольшого размера. Кровь смешивают с реагентом при покачивании планшета. Первые признаки склеивания эритроцитов появляются, спустя 15 секунд, но результат определяют через три минуты. Позитивным для резуса считают появление крупиц свернувшейся крови. Все исследования проводят в лаборатории при температуре 15-25°С и хорошей освещённости.

Ускоренный метод

Используют универсальную serum антирезус. Определение резус фактора крови методика ускоренная включает:

  • Внесение в пробирку капли крови и двух капель препарата «антирезус»;
  • Перемешивают содержимое пробирки поворачиванием без встряхивания. Содержимое равномерно распространяется по стенке пробирки;
  • Добавление в пробирку физраствора в количестве около 3 мл и перемешивание содержимого при неоднократном переворачивании посуды;
  • Наблюдение хлопьеобразования. Там, где они формируются, кровь Rh+.
  • Этот метод быстрый, но не точный. Псевдопозитивная реакция с Rh- эритроцитами проявляется в случае нахождения на поверхности эритроцитов антигенов в крови, отношения к Rh не имеющих. Параллельно проводят ещё один тест с контрольной эссенцией усилителя. Если и в этом случае образуются хлопья, результат признают недостоверным и тестирование крови повторяют с новым реагентом.

Желатиновый метод

Широко используют желатиновый ускоренный метод определения Rh. Он состоит в добавке к крови одной капли 10 % эссенции желатина, десятиминутной выдержки пробирок в термостате при +37, с последующим добавлением подогретого изотонического р-ра NaCl. Желатин препятствует образованию неспецифической агглютинации.

Расшифровка результатов

Проходит 5 минут, и можно оценивать результаты анализа. В больших каплях сыворотки наступает просветление, в одних образуются мелкие хлопья (реакция агглютинации), в других их нет. Здесь возможны варианты:

  • если агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками III и II групп (+ контрольные 1 и 1V) — это первая группа;
  • если свертывание отмечается во всех, кроме II — это указывает на вторую группу;
  • при отсутствии агглютинации только с III сывороткой — устанавливается третья группа крови;
  • если свертываемость отмечается во всех пробах, включая 1V-контрольную — группа четвертая.

Когда сыворотки расположены в правильном порядке, на тарелке проставлены подписи, то ориентироваться легко: где нет агглютинации, такая и группа.

Бывают случаи, когда склеивание видно неясно. Тогда анализ переделывают, мелкую агглютинацию смотрят под микроскопом.

Методика исследования

Алгоритм исследования достаточно прост, специальной подготовки к исследованию от пациента не требуется.

Шаг 1. Разбавление водой

Определение группы может проводиться в нативной крови как с использованием консерванта, так и без него. Для исследования берут капиллярную кровь из пальца пациента.

Кроме того, следует удостовериться, что кровь была взята у пациента правильно, а срок годности используемых реагентов еще не истек.

Шаг 2. Добавляется кровь

На специальную пластину (или планшетку), на расстоянии друг от друга с помощью специальной пипетки наносят по 1 крупной капле каждого из антител (для удобства, лучше располагать их так – А, В, АВ). Возле каждой из капель цоликлонов необходимо поместить по одной капле исследуемой крови и при покачивании планшетки постепенно их перемешать.

Визуально, результаты исследования можно определить уже через 5-10 секунд после начала анализа. В исследуемой крови обнаруживаются так называемые “красные конгломераты” – склеившиеся эритроциты. Образуются они в результате реакции агглютинации, т.е. в том случае, когда цоликлон соответствует антигену (в том числе и при исследовании на резус-фактор). Если же агглютинации не наблюдается, то соответственно имеется расхождение между исследуемыми антигенами и имеющимися антителами.

Шаг 3. Происходит реакция слипания эритроцитов

Расшифровка результатов

Спустя несколько минут после соединения реагентов можно наблюдать результаты. Полное смешивание жидкостей говорит об отсутствии реакции, а агглютинация проявляется появлением красных сгустков в прозрачном растворе. Это эритроциты, которые склеиваются между собой при контакте с несовместимыми моноклональными антителами. Далее можно расшифровать результаты по простому алгоритму:

  • 1 группа (0) — агглютинация отсутствует в обеих каплях, поскольку на эритроцитах отсутствуют агглютиногены;
  • 2 группа (А) — реакция наблюдается в первой капле с цоликлоном анти-А;
  • 3 группа (В) — во второй капле происходит склеивание эритроцитов при контакте с реагентом анти-В;
  • 4 группа (АВ) — появление красного осадка в обеих каплях.

Четвертая группа крови считается самой редкой, поэтому при появлении агглютинации в обеих лунках анализ проводится повторно. Кроме того, кровь необходимо добавить в обычный физиологический раствор, чтобы исключить вероятность опасных заболеваний. У здорового человека она никак не прореагирует с физраствором, а эритроциты не будут склеиваться.

Определение группы цоликлонами

Цоликлоны — это синтетические заменители сывороток. Они содержат искусственные заменители агглютининов ά и β. Их называют эритротестами «Цоликлон анти-А» (розового цвета) и «анти-В» (синего). Ожидаемая агглютинация происходит между эритроцитами исследуемой крови и агглютининами цоликлонов.

Методика не требует использования двух серий, считается более точной и надежной. Проведение и оценка результатов такие же, как в простом стандартном методе.

Вид цоликлоновГруппа крови
Результат агглютинацииАнти-ААнти-В
0(I)
+A(II)
+B(III)
++AB(IV)

Особенность: четвертая группа АВ(IV) обязательно подтверждается реакцией агглютинации со специфическим цоликлоном «анти-АВ» и отсутствием неспецифического склеивания эритроцитов в изотоническом растворе хлорида натрия.

Когда необходим анализ

Если происходит трансфузия резус-позитивной донорской крови резус-негативному реципиенту, возникает резус-столкновение. Иммунная система организма реципиента начинает продуцировать антитела к резус-положительным эритроцитам, они разрушаются. Такое явление получило название «гемолиз». Поэтому, при гемотрансфузии необходимо, чтобы кровь отдающего и принимающего совпадала по группе и по резусу.

Особую опасность представляет резус-конфликт крови во время беременности резус-негативных матерей. Если у резус–негативной матери формируется резус-позитивный плод, иммунная система вырабатывает антитела в крови к эритроцитам эмбриона и разрушает их. Плод, в таком случае, погибает. Риск такого развития событий наиболее вероятен при второй и последующих беременностях. Разработаны методы предохранения от резус-конфликта Rh- матери и Rh+плода, позволяющие сохранить жизнь и здоровье будущего ребёнка.

При беременности очень важно знать резус фактор крови

Определение резус-фактора

  • На поверхность планшета наносится приблизительно 0,1 мл реагента.
  • Рядом капают 0,01 исследуемой крови.
  • Цоликлон и изучаемую жидкость смешивают специальной стеклянной палочкой, каждые полминуты планшет необходимо покачивать.

Важно! Возникновение агглютинации отмечается спустя 15 секунд после перемешивания, ярко заметный эффект наступает через 60 секунд, однако результат, который допустимо считать достоверным, наблюдается только через 3 минуты. В течение всего времени планшет нужно покачивать.

При склеивании и выпадении осадка из эритроцитов кровь считается резус-положительной, а при отсутствии агглютинации резус-фактор получает отрицательную отметку

Увидеть результат при появлении хлопьев эритроцитов можно без использования специального лабораторного оборудования

При склеивании и выпадении осадка из эритроцитов кровь считается резус-положительной, а при отсутствии агглютинации резус-фактор получает отрицательную отметку. Увидеть результат при появлении хлопьев эритроцитов можно без использования специального лабораторного оборудования.

Расшифровка результатов

Спустя несколько минут после соединения реагентов можно наблюдать результаты. Полное смешивание жидкостей говорит об отсутствии реакции, а агглютинация проявляется появлением красных сгустков в прозрачном растворе. Это эритроциты, которые склеиваются между собой при контакте с несовместимыми моноклональными антителами. Далее можно расшифровать результаты по простому алгоритму:

А еще советуем почитать:Что такое группа крови и резус-фактор (таблица)

  • 1 группа (0) — агглютинация отсутствует в обеих каплях, поскольку на эритроцитах отсутствуют агглютиногены;
  • 2 группа (А) — реакция наблюдается в первой капле с цоликлоном анти-А;
  • 3 группа (В) — во второй капле происходит склеивание эритроцитов при контакте с реагентом анти-В;
  • 4 группа (АВ) — появление красного осадка в обеих каплях.

Четвертая группа крови считается самой редкой, поэтому при появлении агглютинации в обеих лунках анализ проводится повторно. Кроме того, кровь необходимо добавить в обычный физиологический раствор, чтобы исключить вероятность опасных заболеваний. У здорового человека она никак не прореагирует с физраствором, а эритроциты не будут склеиваться.

Несовместимость резус-факторов

Если у детей и матери отмечается иммунологическая несовместимость, то женщин наблюдают на протяжении всего периода беременности.

Чтобы исключить возможные осложнения обычно беременной внутривенно вводят антирезус-иммуноглобулин. Данный препарат помогает выведению вырабатываемых женщиной антител, которые являются ответной реакцией на несовместимость с малышом.

Если и у матери, и у плода отмечается отрицательный резус-фактор, то несовместимости не наблюдается, и поэтому анализов, как определить наличие белка в крови малыша, не проводится. Еще раз напомним, что такое понятие, как резус-конфликт, отмечается только в ситуации с разными резус-факторами у беременной и плода.

Реакция со стандартными эритроцитами

Для реакции со стандартными эритроцитами необходимы стандартные эритроциты трёх групп крови: 0 (I), А (II), B (III).

Методика проведения реакции со стандартными эритроцитами

  1. Кровь для исследования берут из вены в пробирку, центрифугируют или оставляют на 30 мин для получения сыворотки.
  2. На маркированную тарелку наносят три больших капли (0,1 мл) сыворотки крови из пробирки, а рядом с ними по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп.
  3. Соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют NaCl 0,9% и оценивают результат.

Оценка результатов проведения реакции со стандартными эритроцитами

Оценивают результаты, полученные со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами. Особенность результатов реакции со стандартными эритроцитами — эритроциты группы 0 (I) считают контрольными. Результат перекрёстного способа считают достоверным, если при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают. Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.

Рекомендуем почитать

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *