Анализ крови на коклюш

Когда необходима иммунология

Несмотря на то, что симптоматика коклюша носит специфический характер, в некоторых случаях возникает необходимость дифференцировать его среди следующих инфекционных и неинфекционных патологий:

  • затяжное течение ОРЗ;
  • пневмония;
  • бронхит;
  • корь;
  • бронхиальная астма;
  • бронхоаденит;
  • муковисцидоз;
  • инородное тело в дыхательных путях.

Чаще всего сомнительная симптоматика при этой болезни бывает, когда детский иммунитет ослаблен или прививка не обеспечила достаточную защиту от проникновения вируса в организм. В этом случае признаки заболевания проявляются слабо и больше похожи на затяжное ОРВИ или бронхит.

Также необходимость в иммунологии возникает в раннем детском возрасте, когда еще нет кашлевого рефлекса и беспокойство в виде захлебывающегося плача может быть как симптомом коклюшной инфекции, так и признаком другого недуга. У малышей иммунодиагностика проводится, даже если симптоматика соответствует проявлениям коклюша.

Иногда при тяжелом течении недуга может возникнуть необходимость в проведении нескольких серологических тестов с небольшим временным интервалом. Это нужно для того, чтобы выяснить, как иммунная система ребенка сопротивляется возбудителю.

Также тест на иммунологию может назначаться здоровым детям. Это необходимо, чтобы  выяснить, болел ли ребенок ранее коклюшной инфекцией.

Возможные осложнения

К особым можно отнести:

  • легочная эмфизема;
  • эмфизема средостения и подкожных клеток;
  • ателектазы;
  • коклюшная пневмония;
  • перебои в дыхательной частоте (приостановки дыхания – апноэ до 30 секунд, остановки – апноэ свыше 30 секунд);
  • ухудшение кровотока в мозге;
  • кровоизлияния (из носа, задней области глотки, бронхов, внешнего слухового пути; в кожу и слизистые, склеру и сетчатку глаз, головной и спинной мозг);
  • возникновение пупочной или паховой грыжи;
  • выпадение слизистой оболочки прямой кишки;
  • повреждение барабанной перепонки и диафрагмы.

К простым самым распространенным осложнениям, возникающим вследствие накопления второстепенной бактериальной флоры, относятся:

  • пневмония;
  • бронхит;
  • ангина;
  • лимфаденит;
  • отит.

Методы диагностики

Диагностика в большинстве случаев проводится клиническим признакам, хотя для полной картины необходимо взятие мазка из носоглотки и проведение исследования крови. Только так можно точно диагностировать болезнь и убедиться в том, что не развиваются осложнения и имеет место непосредственно коклюш.

Так как заболевание бактериальное, то в мазке обнаруживаются его возбудители. В крови же присутствуют антитела к бактерии. Сам возбудитель встречаться в крови не должен, так как если он проникнет в кровоток, разовьётся сепсис (заражение крови).

Что даёт анализ крови?

В первую очередь проводится общий анализ крови, который весьма информативен. Осуществляется он даже в простой лаборатории и потому его сделают в любом медицинском учреждении.

При коклюше в составе крови выявляется значительное увеличение лейкоцитов (иммунных клеток).

Серодиагностика

Более сложным анализом является серодиагностика, при которой в сыворотке крови выделяют антитела, показывающие протекающий инфекционный процесс, а также наличие прививочного или постперенесённого иммунитета к болезням.

Реакция на агглютинации

Это самый популярный анализ крови при коклюше у детей. Этот способ выявления заболевания успешно используется около 50 лет. При данной методике в составе крови выявляют специфические антитела против антигенов возбудителя, выделяемых в первой фазе болезни. Несмотря на популярность, методика имеет существенный недостаток, которым является неспецифичность. При анализе определить конкретно бактерию коклюша невозможно.

Этот вид анализа, хоть он и применяется много лет, не имеет единой системы проведения, и потому результаты могут иметь не одинаковые трактовки в разных лабораториях.
Какой методикой пользоваться, определяет лечащий врач в зависимости от возможностей медицинского учреждения и состояния больного. Возможно одновременное исследование материала и по нескольким методикам.

Реакция латекс-микроагглютинации

Эта методика весьма эффективна и при этом не требует серьёзных материальных затрат от медицинского учреждения. К сожалению, простота анализа приводит не редко и к его ложноположительному результату, который связан с применением антигенов возбудителя в фазе распада.

Во время анализа сыворотку крови, которая разведена в пропорции 1:1, добавляют к полистироловому латексу, который наполнен компонентами палочки коклюша. По тому, какое будет окрашивание, определяется наличие антител к возбудителю в крови.

Реакция нейтрализации более трудоёмка, но и более правдива. При подобном исследовании выявляется количество антител, входящих в кровь и направленных против коклюшной палочки. Проводят анализ преимущественно на клеточном субстрате, полученном из яичников китайских хомяков. Изменения, происходящие с субстратом, и показывают объём антител. Достоинством этой процедуры является возможность выявить даже немногочисленные антитела против возбудителя болезни, которые не определяются при других способах исследования материала. Однако есть у анализа и минус, которым является его сложность и трудоёмкость, а также возможность проведения его не в любой больнице.

ИФА исследование

Иммуноферментный анализ применяется для выявления коклюша с 1980 года. Подобное исследование максимально специфичное и даёт предельно точные показатели, но только при грамотном его проведении.

Сыворотку крови, которая исследуется на антитела, к палочке коклюша добавляют в раствор или клеточную среду, в которой присутствуют возбудители болезни или их части. Также в такой состав добавляется и особый флуоресцеин, содержащий фермент. Он оседает на соединении «антитело и антиген», делая его хорошо видимым под обычным микроскопом.

Проводить такое исследование надо на 4 недели болезни, когда в крови содержание антител достигает высоких значений. До этого точные результаты получить сложно. На ранних сроках лучше проводить посев материала с мазка на бактериальную среду.

ПЦР — диагностика

ПЦР — это максимально чувствительный и точный способ. Берется мазок из зева, и затем посредством фермента ДНК — полимеразы достраиваются копии наследственного материала — Bordtella pertussis, возбудителя инфекции. Этот метод позволяет поставить диагноз со 100% точностью.

Проведение

При подозрении на коклюш или паракоклюш диагноз не может быть поставлен лишь на основании клинических данных. Поэтому выполняют различные лабораторные исследования. К наиболее распространенным относятся:

  • Общий анализ крови.
  • Мазок из носоглотки (микроскопия, посев).
  • Серологический анализ.
  • Молекулярно-генетический метод.

Каждое исследование имеет определенные особенности, требующие отдельного рассмотрения. Какой анализ нужно сдавать пациенту, скажет врач. Специалист проведет клиническое обследование и делает предварительное заключение, на основании которого проводится дальнейшая диагностика. Он выдает направление на лабораторные тесты.

Общий анализ крови

Для проведения общего анализа пациент приходит в лабораторию натощак. Другой подготовки не требуется. Кровь берется из пальца в тонкую стеклянную трубочку-капилляр. Затем медработник подсчитывает количество форменных элементов, гемоглобина, определяет СОЭ и цветной показатель. Срок выполнения составляет 1 сутки. Безусловно, это неспецифический анализ, который проводят при многих заболеваниях.

Мазок из носоглотки

Важным анализом на коклюш у детей является мазок из носоглотки. Он позволяет оценить клеточный состав слизи и выявить в ней патогенные микробы. Перед взятием биоматериала не рекомендуют:

  • Полоскать горло, чистить зубы.
  • Принимать антибиотики, закапывать нос.
  • Сильно высмаркиваться.
  • За 2–3 часа принимать пищу и пить воду.

Исследование проводится на ранних сроках болезни (не позже 3 недель с момента начала), в противном случае результаты могут быть ложноотрицательными. Мазок берется стерильным тупфером – ватным тампоном на длинной палочке – отдельно из носа и горла. Ребенку следует широко приоткрыть рот и немного запрокинуть голову назад. Одним тупфером проводят по задней стенке глотки и миндалинам, а другой вводят в носовые ходы. Тампоны помещаются в пробирки со специальной транспортировочной средой, которая будет поддерживать жизнедеятельность бактерий.

Для цитологии материал наносится на предметное стекло, фиксируется и окрашивается по Грамму. Затем картина описывается под микроскопом. А вот бакпосев – это более длительный анализ. Возбудителю коклюша нужна специфическая питательная среда (кровяной агар). На нее засевается слизь из носоглотки, а затем все инкубируется в термостате. Появившиеся колонии микробов оценивают морфологически и функционально (ферментативная активность, скорость роста).

Материала от пациента можно получить и по-другому – методом «кашлевых пластинок». Тогда открытую чашку Петри с питательной средой подносят к больному ребенку. И в момент кашля слизь сама попадает на нее. Это позволяет исключить этапы взятия мазка и рассевания.

Серологический анализ

Серологическая диагностика коклюша основана на определении антител к возбудителю. Анализ крови на коклюш включает идентификацию в плазме различных классов иммуноглобулинов (A, M, G). Каждый из них показывает, насколько сильно идет защитная реакция со стороны организма. Антитела класса А являются секреторными, они обеспечивают местную защиту слизистых оболочек. Иммуноглобулин M начинает вырабатываться уже спустя 10–14 дней от момента инфицирования. А вот антитела класса G продуцируются значительно позже (через 3–4 недели). Кровь для анализа берется у ребенка из вены натощак.

Детекция антител производится методом иммуноферментного анализа (ИФА). В его основе лежит специфическая реакция между антигеном и антителом. Сыворотку, полученную от пациента, по капле помещают в ячейки иммунологического планшета, в которых уже есть стандартные антигены к Bordetella pertussis.

Молекулярно-генетический метод

Метод полимеразной цепной реакции – еще один анализ, проводимый при коклюше. Он основывается на определении генетического материала (ДНК) бактерии-возбудителя. Для этого анализа берется соскоб из ротоглотки: стерильным тупфером проводят по слизистой оболочке. В лаборатории к биоматериалу добавляются специальные вещества (праймеры, ферменты), которые позволяют многократно копировать фрагменты нуклеиновых кислот. Все это происходит в приборе под названием амплификатор. Он же оборудован и детектором для идентификации генетических цепей микроорганизмов. ПЦР диагностика коклюша – наиболее сложный, но в то же время и самый чувствительный метод, многократно повышающий достоверность анализов.

Расшифровка лабораторных данных

У полученного анализа может быть только 2 результата:

  • Выявлено наличие иммуноглобулинов IgM ( при некоторых видах исследования может быть указано количество антибактериальных титров). В этом случае подтверждается присутствие возбудителя в крови и лабораторные показатели считаются положительными.
  • Антител не выявлено. В этом случае другое заболевание имеет коклюшноподобное течение, но причина недуга не коклюшная палочка.

Также возможен и ложноположительный результат. Это случается у детей, уже переболевших коклюшем и имеющих в организме соответствующие антитела к возбудителю. При коклюшеподобных состояниях, если нет достоверных данных об уже перенесенной болезни, может быть поставлен неверный диагноз.

Как видно, диагностировать коклюш в большинстве случаев можно при обследовании заболевшего. Исследования крови служат только дополнительным способом определения состояния детского здоровья. В сомнительных случаях для уточнения диагноза используются различные иммуноферментные реакции, выявляющие образовавшиеся антитела.

Анализ на коклюш

Первым делом врач может заподозрить наличие коклюша по характерному приступообразному кашлю и наличие в анамнезе контакта с кашляющим человеком. После этого проводится ряд анализов на коклюш, которые способны подтвердить диагноз.

Анализы на коклюш и паракоклюш состоят из нескольких мероприятий.

Общий анализ крови

Анализ на ДНК коклюшАнализ крови на коклюш – проводится в утренние часы, анализ берётся на голодный желудок. За сутки до обследования желательно воздержаться от жареного, жирного и алкоголя. В том случае если в детском возрасте была выполнена вакцинация против коклюша, в результатах все показатели будут в пределах нормы. При ослабленном иммунитете и отсутствии прививки будет наблюдаться повышение показателей лейкоцитов и лимфоцитов.

Биохимический анализ на коклюш

Биохимический анализ на коклюш – проводится для оценки общего состояния организма. Если заболевание ничем не осложнено, то изменений показателей в результатах наблюдаться не будет.

Общий анализ мочи

Лабораторное исследование, позволяющее оценить физико-химические характеристики мочи и микроскопию осадка. Оценивается цвет мочи, ее прозрачность, удельный вес, кислотность (рН). В моче определяется белок, глюкоза, билирубин, уробилиноген, кетоновые тела, нитриты, гемоглобин. В мочевом осадке выявляют клетки эпителия, эритроциты, лейкоциты, цилиндры, бактерии.

Анализ мокроты

Мокрота (выделения из дыхательных путей) собирается в утренние часы, натощак. Отделяемая вовремя кашля мокрота берётся на анализ и сеется в питательную среду для выявления бактерии, спровоцировавшей заболевание. Если мокрота не отделяется, пациенту могут провести ингаляцию тёплым раствором. Мокрота должна сразу же отправляться на обследование, иначе результат может быть ложным. На результаты также может повлиять неправильный сбор мокроты. При данном заболевании в мокроте будет определяться большое количество лимфоцитов.

Бактериальный посев из ротовой полости

Посев на коклюшПроводится на ранней стадии заболевания, до начала лечения, так как на поздних стадиях и при начале лечения антибиотиками выявление бактерии маловероятно. Целью проведения обследования является обнаружение палочки Bordetella pertussis. Перед сдачей анализа на коклюш не рекомендуется употреблять пищу, проводить гигиеническую обработку полости рта. Расшифровка результатов приходит в течение 3−4 дней.

Полимеразная цепная реакция

ПЦР – это современный, один из наиболее достоверных методов обнаружения инфекций. Для ПЦР берётся кровь, мокрота и другие биоматериалы. Для выявления возбудителя данного заболевания чаще всего на обследование берётся мокрота. При положительном результате в исследуемом материале будет обнаружено ДНК вируса. Расшифровка результатов проводится в течение нескольких дней.

Иммунологические анализ

Этот метод диагностики даёт возможность выявить антитела к палочке, которая правоцирует коклюш. Кровь на коклюш берётся натощак из вены или пальца. Палочка Bordetella pertussis выделяет токсины (антигены), в результате этого иммунная система вырабатывает антитела к возбудителю коклюша Igg. Повышение Igg свидетельствует о наличии этого заболевания. При коклюше также появляются антитела к возбудителю коклюша IgM и IgА.

  • IgA — антитела при коклюше появляются в острой фазе болезни.
  • IgM — антитела появляются на ранней стадии развития болезни, при первичном внедрении возбудителя. При проведении вакцинации против коклюша у детей данный показатель тоже может повышаться.
  • IgG — антитела участвуют в формировании иммунитета на протяжении болезни. Повышение показателей IgG свидетельствует о ранее перенесенной или имеющейся на данный момент инфекции.

Реакция латекс микроагглютенации

Даный метод обследования является довольно простым и не требует сильных затрат, но в связи с тем, что в нём используются антигены возбудителя в стадии распада, он может показывать ложный результат.

Лабораторная диагностика

Чтобы выявить коклюш, назначают следующие анализы:

  • Общий анализ крови.
  • Общий анализ мочи.
  • Анализ мокроты.
  • Бактериологический посев.
  • Методика ПЦР.
  • Иммунологическое исследование.
  • Методика латекс микроагглютенации.

ОАК

Если есть подозрении на инфекционную природу заболевания при кашле, и кроме этого симптома также есть повышенная температура и слабость, анализ крови и его расшифровка просто необходимы.

Он может дать точную информацию о том, идёт ли воспалительный процесс в организме. Но о причине этого процесса анализ крове рассказать не может, поэтому он проводится только вместе с другими анализами, которые могут показать общую клиническую картину состояния больного. Не забывайте, что анализ крови всегда сдаётся натощак.

ОАМ

Если есть подозрение на коклюш, при исследовании мочи обращают внимание на наличие осадка, а также цвет и прозрачность, кислотность и удельный вес выделений. Этот анализ помогает выявить возможные осложнения

При обычном течение заболевания, моча не подвергается сильным изменениям.

Биоматериал для анализа (моча) собирается утром, обязательно в чистую емкость, лучше всего, если она будет куплена в аптеке. Отнести мочу в лабораторию нужно как можно быстрей (не позже 2 часов после сбора), тогда эффективность анализа будет выше.

Мокрота

Такой анализ позволяет отличить коклюш от других заболеваний, таких как грипп, туберкулёз и бронхиальная астма. Так же, как и при анализе мочи, в лаборатории изучаются цвет, прозрачность и кислотность мокроты

Кроме этого, обращается внимание на наличие кровянистых прожилок. При коклюше выделяемая мокрота должна быть похожа на слизь

Если эта характеристика меняется, значит присоединилось какое-то другое заболевание.

Собирают мокроту, как правило, утром, так как её активная выработка происходит в ночные часы. Перед этим больной не должен чистить зубы, есть и принимать лекарства. Необходимо только прополаскивает ротовую полость.

Бактериологический посев

Сбор материала для проведения анализа делает медицинский работник, захватывая частички материала с поверхности задней стенки глотки больного специальным тампоном. Такой забор необходимо проводить на 5-7 день болезни, до начала терапии антибиотиками, в противном случае результаты исследования могут оказаться ложными.

Проведение анализа спустя 3 недели после появления заболевания будет малоинформативным. Чтобы сделать исследование более достоверным, его проводят дважды, к примеру, на 5 и 6 день после появления коклюша.

Перед сдачей анализа, пациент не должен чистить зубы, есть и пить, а также полоскать горло. Если этого не удалось избежать, сдавать анализ можно будет не раньше, чем через 2-3 часа.

Методика ПЦР

Этот метод диагностики коклюша является самым лучшим, так как ложноотрицательные результаты встречаются редко, а эффективность зафиксирована в 80%с случаев. Проводится ЦПР в первые 3-4 недели от начала заболевания, когда в слизистой дыхательных путей ещё присутствует возбудитель — Bordetella pertussis. Материал для этого исследования получают, взяв соскоб с задней стенки глотки. Расшифровка занимает 1–2 дня.

Перед проведением анализа не разрешается чистить зубы, есть и пить около 2-3 часов. Незадолго до сбора материала можно прополоскать горло тёплой кипяченой водой.

Как проходит иммунологическое исследование?

Материалом, для проведения этого исследования, служит анализ крови и выделений из носа, которые проверяют на наличие антител к коклюшу, а именно иммуноглобулин М (Ig M), который находится быть в крови, а в слизи из носа должен быть иммуноглобулин А (IgA).

На разных этапах болезни проводятся определенные виды анализов на такие антитела. Их можно выявить только с 3 недели после начала заболевания. В повышенных концентрациях они сохраняются ещё в течение 3-4 месяцев.

Методика латекс микроагглютенации

Это экспресс-метод лабораторной диагностики, результаты которого можно получить уже через 30–40 минут после забора материала. Это исследование позволяет выявить антигены возбудителя коклюша, в том случае, если они уже выработались. В этой методики применяются антигены возбудителя на стадии распада, что изредка может приводить к ложноположительным результатам.

Расшифровка анализа на коклюш

Анализ осуществляется совместно с результатами установления антител иных классов (IgM, IgA)

Bordetella pertussis (бактерия Борде-Жангу)
IgGIgMIgAРасшифровка результатов
ОтрицательноОтрицательноОтрицательноВозбудитель отсутствует
Отрицательно или положительноОтрицательноОтрицательно или положительноГоворит о наличии инфекции
Отрицательно или положительноОтрицательноПоложительноГоворит о присутствии в недавнем времени инфекции
ПоложительноОтрицательноОтрицательноГоворит о недавней или минувшей инфекции, или об осуществляемой ранее иммунизации

Характерные черты коклюша у детей раннего возраста

Инкубационное и предсудорожное время сокращено до 1-2 дней, а время судорожного кашля увеличивается до 6-8 недель.

У новорожденных детей, вместо обычных приступов кашля, наблюдаются эквивалентные симптомы: чихание, необоснованный плач, крики. Диагностируются геморрагические нарушения: кровотечения в ЦНС, иногда – в наружную плотную оболочку глаза и кожные покровы. Состояние больных во время между периодами ухудшено: у детей наблюдается упадок сил, теряются навыки, которые были выработаны до процесса заболевания. Нередко появляются особые обострения, которые иногда могут носить опасный для жизни характер, среди них: апноэ, отклонения от нормального кровотока мозга. Перебои в дыхании, вплоть до временной остановки, могут проявляться и без приступов кашля, например во время сна, или после приема пищи. Среди неспецифичных обострений чаще всего диагностируют пневмонии. Отмечаются смертельные исходы.

Коклюш у детей

Коклюш — высококонтагиозное заболевание, передающееся воздушно-капельным путем. Это заболевание приходится на детский возраст; взрослые болеют им очень редко (частота встречаемости среди всех заболевших у взрослых не составляет и 0,5 процента).

Возбудитель коклюша у детей — бактерия Борде-Жангу (относится к семейству бордетелл Bordetella pertussis). Является грамотрицательной коккобациллой. Попадает в организм через верхние дыхательные пути (при вдыхании аэрозоля, содержащего микроорганизмы). Попадая в носоглотку, микроорганизм начинает вырабатывать свой основной антиген — коклюшный токсин, на который и вырабатывается иммунный ответ. Непосредственное повреждающее влияние оказывают цитолизин и фимбрии. Каждый из антигенов специфичен и отвечает за определенные функции (лизис эпителиоцитов, адгезия и т.д.).

Бактерия поражает преимущественно дыхательные пути и в крови выделяется крайне редко. Если удалось высеять бактерию из взятого анализа, то стоит готовиться к худшему.

Типичная картина заболевания состоит из синдромов:

  • лихорадочного (повышение температуры выше 38°C);
  • поражения дыхательного тракта (интенсивный кашель, который сложно спутать с другими респираторными заболеваниями);
  • интоксикационного (слабость, тошнота, недомогание), неврологического (нарушение сна на фоне интенсивного кашля).

Часто из-за того, что ребенок сильно и долго кашляет, возможно появление небольших ранок или надрывов в области углов рта, на уздечке нижней губы. Наличие данных признаков косвенно позволяет поставить диагноз коклюша.

Ребенок становится заразным уже с первого дня развития заболевания. Обычно заражение происходит при контакте с другими детьми. Передача возбудителя часто наблюдается в тесных детских коллективах (сады, школы), в результате чего наблюдается массовость заражения.

ИФА диагностика коклюша

С 1980 года для диагностики заболевания используется иммуноферментный анализ (ИФА). Данная реакция является более специфичной, чем реакция агглютинации, и позволяет получить более точные и достоверные результаты (в определенных условиях).

Методика заключается в следующем: для проведения реакции можно использовать как непосредственно бактерии и бактериальные комплексы, так и компоненты их клеток, однако, при этом возрастает риск развития перекрестных реакций между антигенами коклюшной палочки и антигенами других грамотрицательных бактерий.

В среду или раствор, содержащий бактерии или их антигены, добавляли сыворотку, которую требовалось исследовать на наличие антител к возбудителю. Кроме того, в раствор добавляли специальные флуоресцеин-содержащие ферменты, которые оседали на образованном комплексе антиген-антитело, и в результате исследования делали данные комплексы видимыми под микроскопом (реакция флуоресценции).

При сравнении полученных результатов было видно, что наиболее точные результаты были достигнуты при определении антител к коклюшному токсину, ФГА и комплекса (ФГА, пертактин и КТ).

Данная методика оправдывает себя при определении антител на 4 неделе развития заболевания. До этого в крови антител мало (преобладают среди них иммуноглобулины класса М).

На более ранних этапах развития заболевания серологические методы не особо эффективны и уступают по результативности бактериоскопии, ПЦР и посевам на питательные среды.

Вышеуказанные серологические методы начинают проводиться уже с 4 недели развития заболевания. Диагноз коклюша считается обоснованным при наличии титра антител не ниже 1:80.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *