Антитела к спермальным антигенам (в крови)

Определение АСАТ

У мужчин АСАТ определяют в семенной жидкости, а у женщин в плазме крови и Cervical mucu. Выявление АСАТ позволяет установить причину бесплодия.

Анализ на определение АСАТ в плазме крови назначают при невозможности определения их в сперме. Забор крови проводят из вены, натощак. Пробу необходимо доставить в лабораторию не позднее чем через два часа, в контейнере-холодильнике.

Как определяют в анализе специфические антитела? Методом иммуноферментного анализа определяют количество АСАТ в крови. Если получен результат, превышающий 100 Ед в 1 мл, то предварительный диагноз «аутоиммунное бесплодие» подтверждается. У женщин, кроме крови исследуют и Cervical mucu.

Одним из методов диагностики является посткоитальный тест Он проводится in vivo. В этом случае объектом изучения является содержимое шейки матки не ранее, чем через 3 часа после коитуса, но не позднее, чем через сутки.  Следует учитывать, что посткоитальный тест проводят в дни, предшествующие овуляции.

Вариант in vivo предусматривает отбор спермы у мужчины и каплю слизи из матки женщины. В поле зрения микроскопа производят оценку их взаимодействия.

MAR-тест-иммуноферментный метод исследования крови. Он бывает непосредственным, когда определяют процент спермиев, сцепленных с антителами, или косвенным. ВА этом случае изучают кровь, плазму спермы и Cervical mucu.

Лабораторное исследование MAR теста крови

Существует метод латекс-склеивания. Это непосредственное определение спектра антител, которые не удалось определить другими методами исследований.

Методы и среды для определения антиспермальных антител

У мужчин лучше определять антиспермальные антитела в сперме. Определение АСАТ в плазме крови является дополнением к анализу спермы. При азооспермии (отсутствии сперматозоидов в сперме) наиболее информативным является определение АСАТ в плазме крови. АСАТ могут принадлежать к разным классам иммуноглобулинов (M, G, A), но наиболее важным является определение IgG, которые легко проходят через биологические барьеры и IgA (секреторных иммуноглобулинов). У женщин следует определять антиспермальные антитела как в цервикальной слизи, так и в плазме крови. Обязательным является определение антиспермальных антител у пар, готовящихся к ЭКО, особенно, если женская плазма будет использована как культурная среда в ЭКО-технологиях. У мужчин, с высокими титрами антиспермальных антител, особенно на головке сперматозоидов, могут быть предложены вспомогательные репродуктивные технологии, такие как ИКСИ (intracytoplasmic sperm injection ICSI).

Наиболее часто используемые методы определения антиспермальных антител основываются на определении антител, направленных против различных мембранных антигенов. «Золотого стандарта» для определения антиспермальных антител, не существуют. Поэтому методы, используемые для их определения, взаимодополняют друг друга.

В ООО «Лаборатории ЦИР» проводится расширенное обследование пары для исключения мужского и шеечного факторов бесплодия. Специалисты нашей лаборатории сперматологии много лет занимаются данными вопросами, и в настоящее время мы можем предложить очень качественное обследование на самом современном уровне.

К методам диагностики иммунологических форм бесплодия, связанных с выработкой АСАТ являются:

1. Посткоитальный тест, или тест взаимодействия сперматозоидов со слизью шейки матки. Он проводится в двух вариантах:

  1. Тест in vivo (проба Шуварского-Симса-Хюнера). Пациентка приезжает на исследование после полового акта в дни, предшествующие овуляции. Исследуется содержимое влагалища и шейки матки. Хотя допустимым сроком между половым актом и исследованием являются 24 ч, мы рекомендуем проведение этой пробы через 3-12 часов после полового акта. Отрицательным («плохим») тест является тогда, когда подвижность сперматозоидов в половых путях женщины часто снижается.
  2. Тест in vitro (проба Курцрока-Миллера). Супруги приезжают на исследование в дни, предшествующие овуляции. Муж сдает сперму, а у жены берется капелька слизи шейки матки. Оценивается взаимодействие сперматозоидов и слизи шейки матки под микроскопом. Отрицательным («плохим») результатом теста является снижение поступательного движения сперматозоидов в слизи шейки матки.

Следует помнить, что самой частой причиной отрицательного посткоитального теста является наличие АСАТ в сперме (т. е. проблема связана с мужем), а не в шейке матки. Однако очень часто наблюдается сочетание роли как мужских, так и женских факторов. Посткоитальный тест является одним из самых «капризных» тестов в обследовании бесплодия. Достаточно велик процент ложных результатов этого исследования. Поэтому посткоитальный тест необходимо дополнять проведением специальных исследований на АСАТ.

2. MAR-тест. Тест, который определяет процент сперматозоидов, связанных с антителами классов IgG и IgA (прямой MAR-тест) и титр антиспермальных антител в биологических жидкостях (спермоплазма, слизь шейки матки, плазма крови) (непрямой MAR-тест). Тест является международно признанным стандартом диагностики АСАТ. Тест обладает высокой специфичностью, но не всегда высокой чувствительностью.

3. Immunobead-тест. Является аналогом MAR-теста. Спектры антител определяемых тестами MAR и immunobead не всегда совпадают, что объясняет часто наблюдаемое расхождение между результатами тестов у одного и того же пациента.

4. Тест латекс-агглютинации проводится редко.

5. Иммуноферментный метод (ELISA). Метод, обычно используемый для определения АСАТ в плазме крови. Является дополнительным методом диагностики АСАТ. Высокие титры АСАТ, определяемых методом ELISA в крови у женщин не всегда связаны с ухудшением прогноза наступления беременности.

Антиспермальные антитела

Антиспермальные антитела (АСА) – антитела, направленные против антигенов мембраны сперматозоидов, которые могут нарушать ее функциональную целостность. Содержание антиспермальных антител в сперме отражает степень нарушений. Как правило, не обнаруживается взаимосвязи между АСА и снижением концентрации или подвижности сперматозоидов, но выявлено нарушение функции сперматозоидов вследствие присоединения АСА к их мембране. Антитела, направленные против антигенов мембраны сперматозоидов, оказывают отрицательное воздействие на фертильные качества спермы: связываясь с поверхностью сперматозоидов, они могут нарушать их проникновение через cumulus и/или zona pellucida, акросомальную реакцию, взаимодействие сперматозоида и яйцеклетки, а также представлять сперматозоиды для разрушения иммунной системой. Это связывание может стать причиной агглютинации сперматозоидов. Также причиной агглютинации сперматозоидов могут стать инфекционные заболевания урогенитального тракта. Поэтому, когда обнаруживается агглютинация сперматозоидов, необходимо исключать урогенитальные инфекции в культуре спермы. Наличие АСА необходимо исключить при повторном отрицательном посткоитальном тесте, т.к. АСА связаны с нарушением проникновения и продвижения сперматозоидов в слизи цервикального канала. Также наличие АСА должно предполагаться у мужчин с субфертильностью, наличием в анамнезе указаний на травмы мочеполовых органов, снижением подвижности или агглютинацией сперматозоидов по данным спермограммы.
АСА обнаруживаются как у мужчин, так и у женщин. АСА определяются у 8,1-30,3% бесплодных мужчин (у здоровых от 2,4-10%) и в высоком титре у всего 6-7% бесплодных мужчин (у здоровых не обнаруживались). Чаще всего (до 70%) АСА выявляются при обструктивных урогенитальных заболеваниях у мужчин, при острых и асимптоматичных урогенитальных инфекциях, хламидиозе, а также у пациентов с раком яичек. Также АСА находят при крипторхизме и орхиопексии. Показано, что АСА не выявляются у мальчиков в течение двух лет после операции по поводу крипторхизма, тогда как у взрослых мужчин, перенесших подобную операцию, АСА выявляют достаточно часто – до 40% случаев. Кроме того, АСА обнаруживают у гомосексуалистов, у ВИЧ-инфицированных мужчин, у пациентов с варикоцеле и с заболеваниями спинного мозга.

В связи с риском интрацитоплазматической инъекции сперматозоида (ICSI) многие специалисты в области репродукции определяют антиспермальные антитела перед выбором соответствующей репродуктивной технологии. У бесплодных мужчин со средним или низким титром АСА оказался эффективнее метод лечения кортикостероидами и стимуляцией суперовуляции в сочетании с внутриматочной инсеминацией. Этот метод лечения был не столь эффективен у мужчин с высокими титрами АСА, у них вероятность зачатия была выше с использованием метода внутрицитоплазматической инъекции сперматозоида (ICSI).

Определение АСА включено в перечень стандартных тестов диагностики мужского и женского бесплодия.
АСА могут быть обнаружены в циркулирующей крови, в семенной жидкости или непосредственно на поверхности сперматозоидов. Проведенные исследования показывают несоответствие между результатами определения АСА в сыворотке крови и сперме. Присутствие гуморальных антител к сперматозоидам в сыворотке крови не влияет на фертильность, пока эти антитела также не появляются в репродуктивном тракте. Таким образом, удобство определения АСА в крови перевешивается недостаточным клиническим значением полученных результатов по сравнению с результатами при определении АСА в семенной жидкости. Наиболее общепринятый метод определения аутоиммунного ответа к сперматозоидам – метод обнаружения АСА на живых сперматозоидах.

Подробно про антитела

Антиспермальные антитела (АСАТ) —это антитела к антигенам, которые являются специфическими белками в организме человека. Появляются антитела на внешних семенных оболочках клеток спермы, развивающейся в мужских яичках. Антигены могут стимулировать выработку антител, когда вступают в контакт с компонентами крови. В нормальных условиях кровь и сперма не смешиваются. Прямой контакт между ними предотвращается ячеистой структурой в семенниках, которая носит название гематотестикулярный барьер. Этот барьер образован клетками Сертоли, прилегающими очень близко друг к другу, тем самым образуя плотные соединения, отделяющие развивающиеся клетки спермы от крови и предотвращающие иммунологическую стимуляцию. Тем не менее, гематотестикулярный барьер может быть нарушен по причинам:

инфекции;
травмы, хирургические вмешательства;
наличие онкологии;
болезни семявыводящих путей.

Когда этот барьер нарушается, антигены спермы вырываются из иммунологически защищенной среде и вступают в непосредственный контакт с элементами крови, которые в ответ запускают иммунологическую атаку.

1 Механизм образования АСАТ

При половом созревании образование сперматозоидов – норма для организма, и они защищены от воздействия иммунной системы гематотестикулярным барьером. Проникновение белков сперматозоидов в кровяное русло возможно только при нарушении проницаемости семенных канальцев и кровеносных сосудов.

На каждом этапе движения сперматозоидов существует свой физиологический защитный механизм. В гонадах гемотестикулярный барьер изолирует сперматозоиды от Т и В-лимфоцитов, способных распознавать чуждые антигены. Затем при транзите сперматозоидов срабатывает защитная способность их к мимикрии. Сперматозоиды избавляются от адсорбированных на их оболочке антигенов и притягивают новые, характерные для данной среды, например женского полового тракта. Кроме того, сама семенная жидкость содержит локальные факторы, подавляющие выработку антител к сперматозоидам. Таким образом, вероятность преодоления всех барьеров в здоровом организме мала.

При инфекционных заболеваниях, травмах, хирургических операциях нарушается целостность барьера, и антитела попадают в кровь, вызывая ответ иммунной системы, в результате которого она атакует сперматозоиды как инородные объекты.

У женщин АСАТ могут образоваться в результате:

  • попадания спермы в пищеварительную систему (при анальном или оральном сексе);
  • воспалительных процессов и травм слизистой оболочки репродуктивных органов;
  • высокой активности лейкоцитов в сперме партнера;
  • большого процента старых сперматозоидов;
  • некорректного ЭКО или неудачной искусственная инсеминации;
  • оперативного вмешательства и т. д.

Норма содержания АСАТ у здоровых мужчин, при которой сперматозоиды способны на оплодотворение, составляет 1-10% от общего количества подвижных нормальных половых клеток.

Образование антиспермальных антител у мужчин

До начала периода полового созревания у мужчины отсутствует сперма. По этой причине специфические антигены, присущие сперме, иммунная система воспринимает как «чужаков». При этом она их не атакует, поскольку сперматозоиды не контактируют с иммунными клетками. Их защищают определённые физиологические механизмы.

Гематотестикулярный барьер, существующий между кровеносными сосудами и семенными канатиками, является первым механизмом. Этот вид барьера создают плотные соединения между базальной мембраной клетками Сертоли. Этот барьер не позволяет иммунным клеткам попасть в семенные канатики, защищая тем самым клетки яичка. Как правило, некоторые сперматозоиды всё же попадают в кровь, что становится причиной запуска против них иммунного ответа.

Если из-за инфекции, травмы или хирургического вмешательства гематотестикулярный барьер нарушается, то иммунные клетки могут проникнуть в генитальный тракт мужчины, сделав сперму доступной для иммунной системы.

Существует несколько факторов, способствующих возникновению у мужчин антиспермальных антител:

– инфекции;

– травмы;

– онкологические заболевания;

– варикоцеле;

– крипторхизм;

– закупорка семявыводящих путей;

– оперативное вмешательство на половых органах.

У женщин обычно не образуются АСАТ, несмотря на то, что при половом акте вовнутрь ее организма попадают «чужие» спермальные клетки. Клетки, которыми покрыта слизистая оболочка влагалища, являются хорошим физиологическим барьером, который не позволяет спермальным клеткам проникнуть в иммунную систему.

Кроме того, скменная жидкость содержит большое количество простагландина Е2, который является потенциальным иммунным супресссором, и IBF – иммуноглобулин связывающий фактор, благодаря которому в репродуктивном тракте не образуются антиспермальные антитела. Но если у женщины имеется воспалительный процесс или различные инфекции, может развиться иммунное распознавание спермы.

Антиспермальные антитела у женщин

Если такие антитела при анализах обнаруживают у женщины в шейке матки, это говорит о том, что они имеются у нее и в других репродуктивных органах — например, в полости самой матки, в трубах, в яичниках. Также они могут быть обнаружены в цервикальной слизи. Присутствие их в шейке матки делает невозможным дальнейшее продвижение сперматозоида естественным путем — они гибнут в течение нескольких часов.

Причины возникновения

  • травмы и нарушения целостности слизистых оболочек;
  • большое количество белых кровяных телец в сперме;
  • механический способ переноса антител со спермой мужа;
  • проникновение в организм «старых» сперматозоидов;
  • если сперматозоиды попали в ЖКТ во время нетрадиционного секса — орального или анального. Если у мужчины в сперме имелись антиспермальные антитела, они при таком виде секса легко впитываются в слизистую женщины, после чего попадают в ее кровеносное русло. Дальше уже иммунная система самой женщины начинает бороться с чужеродными ей телами и у нее вырабатываются антитела;
  • если в результате некорректно проведенной инсеменации сперма попала в брюшину — для женского организма это чужеродные тела, ее организму несвойственные. Иммунная система женщины начинает защищаться и старается удалить их;
  • во время прошлых попыток забора ооцитов при гормональных всплесках во время проведения ЭКО — когда происходит сильнейшая гормональная атака, для того, чтобы у женщины при суперовуляции созрело большее количество яйцеклеток. При заборе ооцитов организм может отреагировать образованием в женском организме большого количества антител, которые попадают в лимфатическую систему.
  • оперативные вмешательства на шейке матки, напр. коагуляция эрозии;
  • неправильное использование оральных и химических контрацептивов — при этом может случиться сбой при их применении, организм ответит острой реакцией;
  • при эндометриозе;
  • как аллергическая реакция на сперму.

Иногда случается ситуация, когда у женщины имеется несовместимость именно со спермой мужа, тогда как другая семенная жидкость дает ей возможность забеременеть.

Эндометриоз — следует особо отметить, как причину женского бесплодия. Это воспалительное заболевание, и как и при любом воспалении организм посылает туда большое количество лейкоцитов, чтобы защитится от пагубного воздействия.

При этом состоянии клетки внутреннего строения матки сильно разрастаются, становятся рыхлыми, в них образовывается большое количество антител, которые при встрече со сперматозоидом разрушают его.

Эндометриоз может быть не только в области матки, но и во всех остальных отделах гинекосферы женщины. Но в любом случае, женские антитела будут уничтожать мужские половые клетки.

Что происходит в организме

Когда сперматозоид под воздействием антител гибнет, его захватывают специальные клетки — макрофаги. Они поглощают его, и «разбирают» на более мелкие компоненты. В дальнейшем эти частички погибшего сперматозоида образуют на поверхности макрофага антигены.

Макрофаг попадает в кровоток, оттуда в лимфоузлы, в которых начинают формироваться несвойственные организму антиспермальные антитела. Эти тела с кровотоком распространяются по организму, попадают в слизистую, где задерживаются, атакуют попадающие туда сперматозоиды, и все повторяется по новому кругу. Получается так, что слизистая, вместо того, чтобы помочь сперматозоиду продвинуться к яйцеклетке, становится у него на пути непреодолимым препятствием.

Даже если беременность все же наступила, есть риск, что АСАТ будут отрицательно влиять на плод, что в конце концов приведет к его гибели.

Поэтому так важно, чтобы слизистая была здоровой — она не допустит контакта сперматозоидов с клетками крови, и такой патологический процесс не будет иметь места.

Так же сперматозоиды не могут полноценно попасть в цервикальную слизь. Существует такое явление, как «дрожание», или «кружение» сперматозоидов на одном месте. Это как раз и происходит со

Лечение

При выявлении антиспермальных тел назначают лечение, основной целью которого является их снижение для наступления беременности. Для этого применяют такие виды лечения:

  1. Плазмаферез – удаление из определённого объёма крови пациента плазмы, в которой обнаружены токсические компоненты.
  2. Искусственная инсеминация спермой мужа, обработанная от наличия антиспермиальных антител.
  3. Контрацептивный метод – использование презерватива сроком на 3–6 месяцев, что препятствует поступление спермы в организм женщины.
  4. Терапия, снижающая вязкость слизи шейки матки.
  5. Вегетативно-резонансная тестирование.

Обратите внимание на то, что бесплодие – это серьёзное заболевание, требующее более тщательного обследования, так как иммунный фактор является одной из причин. Необходимо обязательно пройти обследование обоим супругам ещё и на определение воспалительных инфекций мочеполовой системы

Именно они могут быть основным очагом возникновения антиспермальных антител.

Необходимо отметить, что выявление этих антител у одного или обоих супругов не исключает возможность забеременеть, так как они снижают вероятность зачатия, а не полностью препятствуют.

Антиспермальные антитела у мужчин

Антиспермальные антитела в мужском организме появляются во время образования спермы, то есть в период полового созревания. Их изначальное образование считается нормальным явлением.

Как это ни странно звучит, но сперматозоиды являются чужаками в мужском организме и должны тут же истребляться иммунной системой. Но суть в том, что сперматозоиды находятся в изолированном месте и проникают в кровь только в определенные моменты. К примеру, после хирургического вмешательства или в результате травмы.

Когда это происходит, организм начинает активно защищаться, а это значит, что антитела оказывают на подвижность сперматозоидов негативное влияние. Они становятся вялыми, теряют свою жизнеспособность, и уже не могут оплодотворить яйцеклетку. Это и есть фактор мужского бесплодия.

Их наличие приводит к изменению качественного и количественного состава спермы, в частности:

  • подвижности сперматозоидов;
  • агглютинации;
  • повышению уровня лейкоцитов;
  • изменению семенной плазмы и др.

Все эти изменения зависят от количества сперматозоидов, которые попали под влияние антител. Наибольшее воздействие на подвижность оказывают антитела класса lgM. Вследствие этого воздействия может развиться тяжелая степень астенозооспермии.

В результате исследований обнаружено, что на деформацию сперматозоидов в большей степени влияют антитела класса IgA, особенно если их уровень слишком высок. Классы IgG и IgM делают семенную жидкость более вязкой и поднимают уровень лейкоцитов, помимо этого, антиспермальные антитела в сперме уничтожают сперматозоиды еще на уровне придатка яичка.

В случаях, когда показатели антител слишком высокие, супружеским парам для зачатия ребенка предлагаются дополнительные способы достижения беременности:

  • микроскопический анализ сперматозоидов для плазматического введения в яйцеклетку;
  • оплодотворение путем выбора лучшего сперматозоида;
  • экстракорпоральное оплодотворение.

Эти способы эффективны и приносят хорошие результаты.

Методы определения антиспермальных антител

Если супружеская пара считается бесплодной, тест на наличие АСАТ следует обязательно пройти при обследовании. Таковы рекомендации ВОЗ. Женское бесплодие и проблемы с вынашивание иногда также могут быть связаны с их присутствием.

Для того, чтобы определить наличие в организме антиспермальных антител, используются различные методики. С помощью технологии непрямого твердофазного иммуноферментного анализа можно определить присутствие АСАТ в сыворотке крови.

Насколько сильно влияет наличие антиспермальных антител на развитие бесплодия – однозначного мнения до сих пор не существует. Одна из причин – различия в методиках, позволяющих выявить их присутствие. Существуют классические способы определения АСАТ (Rose et al, 1976), активно используются такие методы, как тест с иммобилизацией спермы (Isojima et al, 1968) и тест на агглютинацию спермы (Kibrick et al, 1952). Но данные методики очень сложны, при этом их результаты являются трудно воспроизводимыми.

Более удобным по сравнению с традиционными методами считается тест-набор, основой которого является иммуноферментный метод (Alexander et al, 1994, Paul et al, 1993, Scheit et al, 1996).

Сочетание преимуществ ИФА-метода, высокой специфичности и чувствительности присутствует у тест – набора Spermatozoa-Antibody-ELISA. С его помощью можно легко осуществить скрининг множества порций сыворотки, чтобы определить иммунологическое бесплодие.

Антиспермальные антитела: лечение

Терапевтические мероприятия для супружеских пар проводятся различные. Это зависит от всего комплекса показателей. Начинается лечение, как правило, с использования барьерной контрацепции. Половые акты с презервативом рекомендованы в постоянном на протяжении 3-6 месяцев или в прерывистом (контрацептив не используется только в благоприятные для зачатия дни) режиме. При снижении объемов проникновения семени в организм партнерши снижается выработка антиспермальных антител. Это существенно повышает шансы супругов на зачатие. Также параллельно может быть назначена терапия, направленная на снижение вязкости цервикальной жидкости (например, вещество гуайфенезин). Если консервативная терапия была недостаточно эффективна, и все еще обнаруживаются антиспермальные антитела, лечение продолжают методом внутриматочной инсеминации или оплодотворением in vitro (экстракорпоральным). Однако у последнего варианта есть противопоказания. В частности, данный способ не применяется, если у супруга обнаружены антиспермальные антитела, направленные на головку сперматозоидов и не поддающиеся лечению с использованием консервативных методов. В случае, если ни один вышеперечисленных вариантов не был эффективным, переходят к использованию вспомогательных репродуктивных технологий (ИКСИ).

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *