Анализы на сифилис

Диагностика сифилиса с применением трепонемных тестов

При проведении трепонемных тестов используются антигены трепонемного происхождения. Их отрицательной стороной является невозможность использования для контроля эффективности проводимого лечения, получение положительных результатов при спирохетозах и невенерических трепонематозах и получение ложноположительных результатов при онкологических заболеваниях, лепре, некоторой эндокринной патологии. Такие тесты, как РПГА, ИФА и РИФ остаются положительными многие годы после излечения сифилиса, а в некоторых случаях и пожизненно.

РИБТ и РИФ являются более специфическими из всех серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса. Они позволяют различать ложноположительные реакции, выявлять поздние формы сифилиса, протекающие с отрицательными реакциями. При помощи РИБТ распознаются ложноположительные реакции у беременных, когда необходимо решить вопрос об инфицированности ребенка.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ, РИТ)

Суть реакции заключается в том, что антитела, находящиеся в сыворотке крови больного, обездвиживают бледные трепонемы. Отрицательной считается реакция при иммобилизации до 20% возбудителей, слабоположительная — 21 — 50%, положительная — 50 — 100%. РИБТ иногда дает ложноположительные результаты. Тест сложный и трудоемкий, однако, является незаменимым при проведении дифференциальной диагностики скрытых форм заболевания и ложноположительных результатов серологических реакций, в том числе у беременных. РИБТ дает 100% положительный результат при вторичном, раннем и позднем сифилисе, в 94 — 100% случаев — при других формах сифилиса.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Суть реакции заключается в том, что бледные трепонемы (антигены), соединенные с антителами, меченными флюорохромами, издают в люминесцентном микроскопе желто-зеленое свечение. Результат оценивается знаком (+). С помощью РИФ выявляются иммуноглобулины класса А.  Реакция иммунофлюоресценции становится положительной раньше, чем реакция Вассермана. Она всегда положительная при вторичном и латентном сифилисе, в 95 — 100% случаев положительная при третичном и врожденном сифилисе. Техника проведения данного вида исследования проще, чем у РИБТ, но заменить РИФ на РИБТ невозможно, так данная реакция уступает РИБТ по специфичности. РИФ-10 (модификация РИФ) более чувствительна, РИФ-200 и РИФ-абс более специфичны.

Рис. 9. Анализ крови на сифилис — реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Реакция иммунного прилипания бледных трепонем (РИПБТ)

Суть реакции заключается в том, что сенсибилизированные сывороткой больного бледные трепонемы в присутствии комплемента прилипают к поверхности эритроцитов. Полученные комплексы при цетрофугировании выпадают в осадок. Чувствительность данного теста и специфичность близки к РИФ и РИБТ.

Иммуноферментный анализ на сифилис (ИФА)

С помощью ИФА определяются иммуноглобулины класса М и G. Методика IgM – ИФА может быть использована в качестве скринингового и подтверждающего теста. Чувствительность ИФА и его специфичность аналогичны РИФ. При сифилисе ИФА дает положительные результаты с третьего месяца инфицирования и довольно долго (иногда всю жизнь) остается положительным.

Рис. 10. Иммуноферментный анализатор.

Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (РПГА)

РПГА основана на способности эритроцитов, на которых адсорбированы антигены бледной трепонемы, в присутствии сыворотки больного склеиваться (гемагглютинация). РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса, в том числе скрытого. При применении высокого качества антигена данный вид серологической реакции превышает все остальные тесты по специфичности и чувствительности.

Рис. 11. РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса.

Рис. 12. Анализ на сифилис — реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (схема).

Рис. 13. Вид перевернутого зонтика, занимающего все дно пробирки, свидетельствует о положительной реакции. В случае, когда эритроциты оседают столбиком («пуговка») в центре дна пробирки говорят об отрицательной реакции.

Рис. 14. Тест РПГА в лабораторных условиях.

RPR: когда тест может дать ложноположительные результаты?

RPR – нетрепонемный тест, он не является строго специфичным в отношении сифилиса.

Поэтому такой анализ редко, но все-таки может дать ложноположительный результат.

Именно по этой причине RPR не является диагностическим критерием сифилиса.

При получении положительных результатов скринингового теста обязательна перепроверка анализа трепонемными тестами.

Почему так получается?

Дело в том, что липопротеиды возбудителя сифилиса схожи с липопротеидами тканей человека.

Поэтому в отдельных случаях тест обнаруживает не результат деятельности бледной трепонемы.

Анализ может показывать специфические изменения в организме.

К ложноположительной реакции располагают следующие состояния:

  • Инфекционные болезни в острой стадии;
  • Травмы;
  • Инфаркт миокарда, особенно свежий;
  • Отравление;
  • Недавняя вакцинация или прививание;
  • ВИЧ и гепатиты;
  • Антифосфолипидный синдром;
  • Болезни соединительной ткани;
  • Аутоиммунные заболевания;
  • Повреждения печени;
  • Беременность.

Кроме этого, ложноположительный результат могут дать пищевые продукты.

Это происходит в случае употребления накануне анализа.

Не рекомендуется за сутки до теста принимать жирную и острую пищу, алкоголь.

Когда нужно сделать RPR ребенку

Сдавать кровь, проводить исследование ребенку следует при подозрении на заражение бледной трепонемой.

Ситуаций может быть несколько.

Ребенок только родился, мама была больна сифилисом.

Малышу анализ RPR нужно проводить в роддоме для исключения внутриутробной передачи инфекции.

У ребенка может развиться врожденный сифилис.

Он проявляется различными пороками развития.

Клинические симптомы заметны сразу при рождении.

Иммунная система новорожденных и детей несовершенна, болезнь является опасной.

В любом возрасте ребенку проводится диагностика сифилиса, в том числе и RPR анализ.

Это происходит, если у кого-то из домашних выявлено заболевание.

Так как дети находятся в группе риска, их обследование проводится немедленно.

Такой анализ выполняется обязательно.

Если есть какие-либо симптомы сифилиса у малыша, сразу проводится диагностика заболевания.

Анализ RPR делается одним из первых, он является методом точной диагностики.

Дети подвержены заражению от родителей больше чем другие люди.

Так происходит, потому что иммунная система не развита.

Разновидности тестов

Существует два типа:

  • Специфический, дающий результат положительного типа даже в случае, когда заболевание уже вылечено;
  • Неспецифический, проявляющийся при наличии патологии в данный момент.

Появление отрицательных данных в результатах неспецифического анализа является неким свидетельством крепкого организма.

 Проверки специфические

  • Иммуноблоттинг;
  • Иммуноферментный анализ;
  • РИФ (метод Кунса), еще называют реакцией иммунофлуоресценции;
  • Реакция иммобилизации бледных трепонем;
  • Реакция пассивной агглютинации.

Механизм работы специфических проверок заключается в том, что при воздействии на организм бактерий, вырабатываются антитела, атакующие в ответ опасные микроорганизмы. Образуются иммуноглобулины М спустя 14 дней после заражения. Благодаря им врачи узнают о том, что пациент совсем недавно заразился. Если не предпринимать никаких терапевтических методик, появившиеся тела сохраняются в организме долгие месяцы и даже годы. Появление иммуноглобулинов G свидетельствует о том, что с момента проникновения инфекции прошел месяц. Антитела могут находиться внутри на протяжении всего последующего жизненного срока.

Проверки неспецифические

  • Микрореакция преципитации;
  • Реакция Вассермана.

Проводят во время комплексных медицинских исследований на сифилис. Если организм поражен инфекцией, клетки массово гибнут, что приводит к ответной реакции. Начинается активная выработка особенного типа белков иммунной системой. При помощи теста выявляются белки, чью концентрацию можно исследовать и сделать подсчеты. После полного выздоровления пациента результаты выдают отрицательные показатели.

Анализ спинно-мозговой жидкости

В некоторых случаях для диагностики нейросифилиса берут анализ ликвора.

Это обследование назначается всем пациентам со скрытым сифилисом, если у них существуют признаки патологии нервной системы, а также при скрытом и позднем нейросифилисе.

Кроме того, анализ выполняется всем пациентам после выздоровления при сохранении у них положительных серологических реакций. Мы уже писали в нашей статье, что такое явление случается нередко.

Анализ ликвора при сифилисе назначает и проводит только врач.

Спинно-мозговую жидкость получают путем прокола между двумя позвонками поясничного отдела. Ее собирают по 4 мл в две пробирки. Затем место пункции обрабатывается йодом и накрывается стерильной повязкой. После пункции пациент должен лежать на животе с приподнятым ножным концом кровати не менее 3-4 часов, затем он может лечь на бок. Постельный режим после пункции показан в течение двух суток.

Ликвор из первой пробирки исследуют с помощью общепринятых реакций на содержание белка, клеток, определение признаков менингита (воспаления мозговых оболочек).

Спинно-мозговая жидкость из второй пробирки исследуется на содержание антител к трепонеме с помощью реакции Вассермана, РМП, РИФ и РИБТ, о которых мы говорили выше.

По степени выраженности нарушений различают четыре вида изменений ликвора. Анализируя их, врач может сделать вывод о наличии разных форм поражения нервной системы (сосудистый нейросифилис, сифилитический менингит, менинго-васкулярный сифилис, спинная сухотка, поздний мезенхимальный нейросифилис), а также о выздоровлении больного с положительными серологическими тестами.

Расшифровка результатов

Как уже отмечалось ранее, если человек болен, первые реакции можно получить после двух-шести недель. При этом многие, кто болел сифилисом, сталкивались со следующей ситуацией.

В первые две недели никакой реакции чаще всего нет. После пяти-шести недель развития возбудителя в организме у четверти испытуемых отмечается положительная реакция, у большинства же положительный результат демонстрируется только после семи-восьми недель.

Если речь идет о вторичном варианте, то реакция будет всегда положительной. Кроме выявления возбудителя, тест помогает определить примерный срок заражения, что помогает установить человека, который болел сифилисом и соответственно, передал его другому.

Стоит отметить, что без соответствующего лечения сифилис может перейти в скрытую форму, при этом если выполнить тест, результат его будет отрицательным. Однако, как только случится рецидив, реакция станет положительной. Именно поэтому в рамках скрытой стадии без лечения нельзя говорить о том, что человек болел, но выздоровел. Это лишь благоприятный в долгосрочном прогнозе симптом.

После наступления третичного периода активных поражений, лишь у четверти заболевших не встречается положительной реакции. Когда активные проявления последнего периода исчезали, результат становится отрицательным. В таких случаях, для человека, который болел, это также не говорит об излечении.

Нередко сифилис передается от матери ребенку при рождении. В таких случаях после проверки крови практически всегда будет демонстрироваться положительная реакция

Это очень важно для верного лечения с самого начала. При позднем врожденном заболевании результаты соответствуют показателям человека в третичной стадии сифилиса после его приобретения

Для лечения выполнение подобных тестов жизненно необходимо. Дело в том, что если при энергичной терапии против возбудителя анализы не становятся чистыми, то можно говорить о заболевании серорезистентного типа. В таком случае выполнять обычное лечение бессмысленно.

Прямые и непрямые методы дагностики сифилиса

Прямые тесты — это методы непосредственного выявления возбудителя в материале из очагов поражения. Прямые методы диагностики позволяют установить окончательный диагноз сифилитической инфекции, т.к. основаны на обнаружении T. pallidum в биологических образцах. Исследования проводятся с помощью темнопольной микроскопии и молекулярно-биологических методов (прежде всего ПЦР). Эти методы используются при наличии видимых сифилитических поражений.

Прямые методы используются для диагностики ранних форм заболевания, первичного и вторичного сифилиса с клиническими появлениями (эрозивно-язвенными элементами); для подтверждения врожденного сифилиса (для анализа используют ткань пуповины, плаценты, органы плода, отделяемое слизистой оболочки носа, содержимое пузырей, отделяемое с поверхности папул).

Прямые методы:

  • микроскопия в темном поле (темнопольная микроскопия, ТПМ; dark field microscopy, DFM) и другие методы микроскопии;
  • метод прямой иммунофлюоресценции (ПИФ; direct immunofluorescent assay, DFA)
  • молекулярно-биологические методы детекции ДНК бледной трепонемы (полимеразная цепная реакция, ПЦР; polymerase chain reaction, PCR) и другие тесты на амплификацию нуклеиновых кислот (МАНК; nucleic acid amplification test, NAAT)
  • ДНК-зондирование или гибридизация нуклеиновых кислот (ГНК) ;
  • заражение кроликов инфицированным материалом от больных (rabbit infectivity test-RIT). Этот метод является старейшим, но в силу экономических, организационных трудностей, длительности в практике медицинских учреждений не используется.

Серологические (непрямые) методы дают возможность выявлять в крови больных или антитела, специфичные для определенного возбудителя инфекционного заболевания, или антигены (в  большинстве случаев – белки) самих микроорганизмов. В основе всех серологических реакций лежит взаимодействие антигена и антитела. Методы серологической диагностики сифилиса базируются на выявлении антител к возбудителю сифилиса в сыворотке крови или в спинномозговой жидкости.

Серологические методы очень важны при диагностике сифилиса из-за того, что возбудитель сифилиса не культивируется на питательных средах in vitro, практически незаметен в «светлом поле» микроскопа, не окрашивается практически никакими стандартными лабораторными красителями и плохо сохраняется вне организма больного. Кроме того, в последние годы довольно часто наблюдается скрытое течение сифилитической инфекции, что затрудняет получение биологического материала, пригодного для прямой идентификации T. pallidum.

Схема лечения сифилиса при положительных анализах

На стадии положительного теста RPR лечение не назначается.

Терапию начинают только при подтверждении результатов RPR специфическими трепонемными тестами.

Для лечения сифилиса используются антибиотики.

Наиболее эффективной до сих пор остается пенициллиновая группа.

Препараты вводятся, как правило, внутримышечно.

Количество инъекций и частота их введения зависят от выбранного препарата.

Срок лечения колеблется от 10 дней до двух недель.

В некоторых случаях время терапии может увеличиться до 28 суток.

Это происходит при позднем врожденном сифилисе или на третьей стадии болезни.

При непереносимости пенициллинов используют антибактериальные препараты других групп:

  1. Тетрациклины;
  2. Цефалоспорины;
  3. Макролиды;
  4. Азалиды.

Тетрациклины показывают высокую эффективность против бледной трепонемы.

Но следует помнить, что этот препарат довольно тяжело переносится многими людьми.

Тетрациклины не могут быть использованы для лечения беременных.

Этот препарат токсичен в отношении плода.

Среди цефалоспориновых антибиотиков высокую активность против возбудителя проявляет только Цефтриаксон.

Этот препарат вводится внутримышечно.

Использовать в качестве растворителя новокаин нельзя.

Он резко снижает антибактериальную эффективность препарата.

Оптимально разводить Цефтриаксон водой для инъекций.

Макролиды и азалиды – еще одни препараты резерва для терапии сифилиса.

Их используют при непереносимости других групп антибиотиков.

Кроме того, такие антибиотики назначают при неэффективности предыдущего лечения.

Макролиды не применяют для лечения нейросифилиса.

При этой форме заболевания антибиотики такой группы неэффективны.

Исследование крови

В зависимости от того, на каком конкретно этапе развития находится патология, будет отличаться последующая терапия. Но для установления стадии без соответствующего клинического испытания не обойтись.

То, как называется каждая фаза, подскажет степень серьезности болезни. Так, первичный сифилис свидетельствует об образовании специфичной язвы. В профессиональной терминологии ее называют твердым шанкром. Одновременно с этим у пострадавшего воспаляются лимфатические узлы.

Если сдать кровь из вены на начальной ступени поражения, то получится достигнуть наиболее высокой продуктивности последующей программы терапии. Но при игнорировании первичной тревожной симптоматики можно лишь дотянуть до вторичного сифилиса.

Ему свойственно появление особенной кожной сыпи. Также пострадавший становится крайне заразным, представляя существенную угрозу для окружающих. Так как внутренний резерв сил идет на борьбу с инфекцией, иммунитет постепенно ослабевает. Это говорит о том, что подцепить гепатит или любое другое заболевание подобного рода становится на порядок проще.

Отдельно рассматривается латентное течение, когда отсутствуют типичные признаки поражения. Обнаружить их сможет разве что специфичный лабораторный тест. Но бессимптомное течение еще не говорит о том, что пострадавший перестал быть заразным. Особенно опасной оказывается возможность передать инфекцию от матери плоду.

Заключительная стадия, которая называется третичной, включает тяжелые кожные поражения, разрушение мозга, костей и внутренних органов. Подобное происходит приблизительно с третью всех заразившихся, большая часть из которых попросту тянула до последнего, либо не лечилась должным образом.

Основой для современной тактики обследования предполагаемого больного является не только опрос и осмотр, как это было еще сотню лет назад. Теперь главным инструментом в установлении точного диагноза числится специфичный тест, для проведения которого требуется кровь потерпевшего.

Речь идет об анализе на антитела классов IgG и IgM. Первый вариант указывает на возможные выявленные антитела к возбудителю болезни. Не зря среди медиков его коротко называют просто «трепонемным тестом».

Вторая версия предусматривает изучения неспецифичных антител. Здесь основа базируется на обнаружении компонентов, которые высвобождаются из разрушенных возбудителем недуга клеток.

Подобный подход имеет несколько названий, но все они сохраняют общий принцип:

  • неспецифический антифосфолипидный тест;
  • нетрепонемный антикардиолипиновый тест;
  • реагиновый тест.

Все вышеперечисленное базируется на основе, заложенной в алгоритме RW, что означает реакцию Вассермана.

Оба клинических решения применяют не только для диагностики патологии. Их используют во время сильнодействующей терапии, чтобы оценить текущую динамику выздоровления, и после лечения.

Отличия между двумя процедурами заключается разве что в итогах обследования уже успешно преодолевшего болезнь человека. Так, нетрепонемные результаты по завершении успешно пройденного медикаментозного курса покажут отсутствие реакции. Отрицательный ответ объясняется отсутствием биологических процессов, связанных с разрушительным воздействием возбудителя на здоровые клетки тела.

Но вот трепонемный аналог, даже после того как срок успешного излечения закончился давно, навсегда окажется положительным. Отсюда следует, что положительный ответ не всегда гарантирует рецидив.

Помимо двух наиболее востребованных диагностик существует еще несколько, которыми пользуются немного реже по разным причинам, но они все равно практикуются в лабораториях.

Речь идет о:

  • РПГА;
  • РИБТ;
  • иммуноблотинге.

Если актуален серологический подход, то стратегия может расширяться еще больше. Обычно она охватывает ИФА. А вот об особенностях РМП и МРП стоит узнавать у лечащего врача индивидуально.

Существующие методы лабораторной диагностики сифилиса.

Сифилис является одной из самых известных и опасных венерических болезней. Сложно найти инфекцию, для лабораторных исследований которой применялся бы такой широкий спектр методов, как для сифилиса.

Лабораторное распознавание сифилиса отличается от диагностики других бактериальных инфекций тем, что, в отличие от многих патогенных микроорганизмов, Тreponema pallidum очень требовательна к составу искусственных питательных сред, и на обычных средах не размножается. Она растет на средах, содержащих почечную или мозговую ткань, в строго анаэробных условиях при температуре 35 °С.

Поэтому культивирование бледных трепонем на искусственных питательных средах возможно, но требует сложных специальных сред и анаэробной установки. При этом культуральные бледные трепонемы быстро теряют свою болезнетворность и меняют биологические (биохимические, физиологические) и морфологические свойства. Методы стабильного получения культур до настоящего времени отсутствуют.

Невозможность культивирования патогенных трепонем заставляет искать альтернативные методы определения микроорганизмов или антител к ним. Наряду с традиционными, открытыми в начале 20-го века, разрабатываются новые, более чувствительные и специфические методы. Эти методы должны удовлетворять следующим требованиям:

∎ высокая чувствительность и специфичность;

∎ соответствие метода исследования стадии и форме заболевания, а также распространенности инфекции в популяции;

∎ возможность получения объективных результатов и их прогнозирование;

∎ возможность автоматизации исследования, учета, архивирования и анализа полученных результатов;

∎ стандартизуемость процесса диагностического исследования, учета и анализа полученных результатов

Разработанные к настоящему времени методы лабораторной диагностики сифилиса можно классифицировать различным образом. Они могут быть разделены по различным критериям:

  • прямые и непрямые (косвенные);
  • тесты на антитела и прямые тесты на антиген;
  • трепонемные (специфические) и нетрепонемные (неспецифические);
  • отборочные (скрининговые), подтверждающие и диагностические;
  • приборные и бесприборные.

Каждый вид тестов имеет свои преимущества и ограничения.

Какой анализ на сифилис наиболее точный?

После ложноположительного скринингового результата на сифилис следует выполнить исследование, которое точно покажет: есть у вас сифилис, или его нет.

Какой анализ нужно сдать на сифилис для получения точного ответа?

Точными анализами на сифилис являются всего несколько тестов:

  • Первый метод называется реакция иммобилизации бледных трепонем или РИБТ.
  • Второй точный метод определения сифилиса, который может использоваться и на ранних стадиях называется реакция иммунофлюоресценции или РИФ.

Однако эти анализы достаточно дорогостоящие и долго выполняются из-за сложности постановки.

Поэтому более широко применяются так называемые «трепонемные анализы».

Самым точным из анализов является ПЦР анализ на возбудитель сифилиса – бледную трепонему.

При его постановке происходит поиск ДНК (генетического материала) трепонемы.

Однако постановка такого анализа по крови еще не отработана в России.

А вот соскобы с поверхности любых сифилитических высыпании, в том числе твердого шанкра, высыпаний вторичного и третичного сифилиса, очень информативны.

По сути это могут быть первые положительные результаты, например при первичном сифилисе.

Данный анализ делается в нашей клинике в течение 1 дня.

Кроме того, наиболее широко используется специфические трепонемные реакции на антитела к возбудителю сифилиса.

Это анализы на суммарные антитела (иммуноглобулины М и G вместе).

А так же отдельные анализы на иммуноглобулины М и G по отдельности.

Первым при сифилисе у человека образуется иммуноглобулин М к трепонеме.

Это происходит через 3-5 недель.

Держится этот анализ положительным до 6-12 мес после заражения.

Поэтому по нему определяют ранние формы заболевания и активность процесса.

Удобство состоит в том, что от входит в суммарные антитела.

После лечения он должен постепенно исчезнуть из крови.

Иммуноглобулин G образуется через 6-8 недель от момента заражения.

Он показывает сифилис чаще на протяжении всей жизни, даже после перенесенного лечения.

Однако, в этом случае наблюдают за концентрацией этого анализа.

Какой анализ на сифилис показывает раннюю стадию?

Сифилис это достаточно коварная инфекция.

Инкубационный период при сифилисе составляет порядка 21 дня.

В этот период, зараженный человек не проявляет абсолютно никаких симптомов свидетельствующих о сифилисе.

Тем не менее, такой человек может быть заразным для других людей.

Большинство серологических реакций показывает отрицательный результат на ранней стадии сифилиса.

Положительными тесты становится только после появления твердого шанкра.

Если вы хотите определить сифилис на ранней стадии, следует выполнить определенные тесты.

Во-первых, используйте ПЦР анализ с поверхности высыпаний.

Он является самым ранним показателем сифилиса.

Во-вторых, подходит определение иммуноглобулина М, о котором говорилось выше.

Анализ, который показывает раннюю стадию сифилиса называется РИФ.

Реакция иммунофлюоресценции при определении сифилиса играет важную роль.

Это основной тест, который используется на ранних стадиях сифилиса.

Есть специальные анализы, которые показывают эффективность лечения сифилиса антибиотиками.

Например, это современный ПРП тест, о котором говорилось ранее.

Снижение титра данного теста говорит об успешном лечении сифилиса.

Есть специальные тесты, которые позволяют выявить сифилис даже на поздних стадиях.

Если вы сомневаетесь, какой анализ нужно сдать на сифилис и через какое время сдать анализ на сифилис, проконсультируйтесь у врача венеролога.

Широко распространена реакция пассивной гемагглютинации на сифилис (РПГА).

В ее основе так же выявление суммарных антител к бледной трепонеме.

При их наличии в пробирке с реактивом происходит выпадение темного осадка.

Данный анализ так же становится положительным через 3-6 недель и выполняется в титрах (разведениях).

Это позволяет использовать РПГА на сифилис в комплексном контроле излеченности сифилиса.

Получить консультацию врача венеролога вы можете в нашей клинике быстро и анонимно.

Клиника располагает собственной лабораторией, в которой возможно выполнение большинства анализов на сифилис.

При подозрении на сифилис обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с 15 летним опытом работы.

Как подготовиться

Соблюдение правил сдачи анализов позволяет избежать получения ложных результатов. Подготовка предусматривает некоторые ограничения – для проведения исследования на сифилис методом RW необходимо воздерживаться от приема пищи в течение 8-12 часов до взятия биоматериала. На протяжении 7 предшествующих процедуре дней запрещено принимать какие-либо антибиотики, употреблять алкогольные напитки

За час до сдачи крови важно исключить курение

При игнорировании таких требований алкоголь, находящийся в печени, может спровоцировать ложноположительные (или ложноотрицательные) анализы.

4. ДНК-гибридизация

ДНК-гибридизация выполняется in vitro и основана на полном или частичном соединении двух одноцепочечных молекул ДНК в одну молекулу. В случае полного соответствия комплементарных фрагментов объединение происходит легко. Если комплементарное соответствие частичное, то объединение цепочек ДНК происходит медленно. На основании времени слияния цепей можно оценить степень комплементарности.

При нагреве ДНК в буферном растворе разрываются водородные связи азотистыми основаниями, являющимися комплементарными, в результате цепочки ДНК расходятся. Далее получают препарат из двух денатурированных дезоксирибонуклеиновых кислот. При охлаждении одноцепочечные участки ренатурируют. Образуется так называемый гибрид ДНК.

Метод позволяет оценить и анализировать скорость отжига, учитывая особенности (сходства и различия) ДНК между видами или внутри вида.

Применение ДНК-зонда заключается в гибридизации меченого фрагмента ДНК со специфичным участком ДНК для идентификации комплементарных последовательностей нуклеотидов. Для метки зонда используется группа ненасыщенных атомов (хромофоры) или радиоактивные изотопы.

ДНК–зонд применяют для гетерогенного и гомогенного детектирования нуклеиновых кислот. Роль зонда заключается в определении участков, на которых произошло слияние мишень-зонд. Детектирование в гомогенной системе имеет преимущество – позволяет отследить гибридизацию молекул ДНК в реальном времени.

Суть метода сводится в денатурации ДНК и ренатурации (воссоединения цепочек ДНК). Процесс ренатурации нуклеиновой кислоты и ДНК-зонда заканчивается образованием «гибрида».

Специфические последовательности нуклеиновых кислот гибридизуются с ДНК–зондом и, таким образом, выявляются и позволяют оценить количество ДНК в исследуемом материале.

Расшифровка результатов анализа

При первичном сифилисе реакция Вассермана становится положительной на 6-8 неделе течения заболевания (в 90 % случаев), при этом отмечается следующая динамика:

  • в первые 15-17 дней после заражения реакция у большинства больных, как правило, отрицательная;
  • на 5-6-й неделе заболевания примерно у 1/4 части больных реакция становится положительной;
  • на 7-8-й неделе заболевания RW становится положительной у большинства.

При вторичном сифилисе RW положительна всегда. Вместе с другими серологическими реакциями (РПГА, ИФА, РИФ) позволяет не только выявить наличие возбудителя, но и выяснить приблизительный срок заражения.

При развитии сифилитической инфекции на 4-й неделе заболевания, после возникновения первичной сифиломы, реакция Вассермана переходит из отрицательной в положительную, оставаясь таковой и во вторичном свежем, и во вторичном рецидивном периоде сифилиса. В скрытом вторичном периоде и без лечения RW может переходить в отрицательную с тем, чтобы при наступлении клинического рецидива сифилиса вновь стать положительной. Поэтому, в скрытом периоде сифилиса отрицательная реакция Вассермана не свидетельствует о его отсутствии либо излеченности, а лишь служит благоприятным прогностическим симптомом.

При активных поражениях третичного периода сифилиса положительная RW встречается приблизительно в 3/4 случаев заболевания. Когда же активные проявления третичного периода сифилиса исчезают, она часто переходит в отрицательную. В этом случае отрицательная реакция Вассермана у больных не свидетельствует о том, что у них нет сифилитической инфекции.

При раннем врожденном сифилисе RW практически во всех случаях положительна и является ценным методом для верификации болезни. При позднем врожденном сифилисе результаты ее соответствуют таковым, полученным в третичном периоде приобретенного сифилиса.

Большое практическое значение имеет исследование реакции Вассермана в крови у больных сифилисом, подвергающихся лечению. У некоторых больных, несмотря на энергичную противосифилитическую терапию, реакция Вассермана не переходит в отрицательную — это так называемый серорезистентиый сифилис. В данном случае проводить бесконечно противосифилитическую терапию, добиваясь перехода положительной RW в отрицательную, не имеет смысла.

Из изложенного выше следует, что отрицательная реакция Вассермана, не всегда является признаком отсутствия сифилитической инфекции в организме.

Возможна положительная реакция Вассермана у людей при ряде других, не связанных с сифилисом заболеваниях и состояниях: туберкулёзе, системной красной волчанке, заболеваниях крови (лейкемиях), проказе, пемфигусе, лептоспирозе, злокачественных новообразованиях, тифах, скарлатине, болезни бери-бери, сонной болезни, во время беременности, перед родами или после них, менструации, после наркоза, после употребления спиртных напитков, у лиц, злоупотребляющих наркотиками, приёма жирной пищи, лекарств, введения чужеродных сывороток. В таких случаях для уточнения диагноза используются другие методы (РПГА, ИФА, РИФ). Очень характерна неспецифическая положительная реакция Вассермана при малярии, особенно в приступный период. Поэтому если RW положительна у человека без клинических проявлений сифилиса и отрицающего у себя сифилитическую инфекцию, следует подумать о малярии.

Всё перечисленное свидетельствует о том, что положительный результат реакции Вассермана, еще не является безусловным доказательством наличия сифилитической инфекции.

Восстановление после сдачи анализа

После сдачи анализа крови врачи рекомендуют правильное и сбалансированное питание, а также как можно больше жидкости. Можно позволить себе теплый чай и шоколад. Будет полезным воздержаться от физических нагрузок и ни в коем случае не принимать алкоголь.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *